DNA的生物合成-课件.pptVIP

二、真核生物的DNA生物合成 DNA合成期 G1 G2 S M 细胞能否分裂，决定于进入S期及M期这两个关键点。G1→S及G2→M的调节，与蛋白激酶活性有关。 哺乳动物细胞周期 （一）复制的起始iniation 真核生物每个染色体有多个起始点，是多复制子复制。复制有时序性，即复制子以分组方式激活而不是同步起动。 复制的起始需要DNA-polα（引物酶活性）和polδ（解螺旋酶活性）。还需拓扑酶和复制因子(replication factor, RF)。 3? 5? 5? 3? 领头链 3? 5? 3? 5? 亲代DNA 随从链 引物 核小体 （二）复制的延长elongation （三）复制的终止termination ？ 染色体DNA呈线状，复制在末端停止。 复制中岡崎片段的连接，复制子之间的连接。 染色体两端DNA子链上最后复制的RNA引物，去除后留下空隙。 5? 3? 3? 5? 5? 3? 3? 5? + 5? 3? 3? 3? 3? 5? 5? 控制着细胞的分裂次数，端粒随着细胞分裂每次变短，短到某个程度，细胞将不再分裂。人的一生中，细胞大约能分裂50～60次。端粒长短就成为表示细胞“年龄”的指标。 端粒(telomere) 指真核生物染色体线性DNA分子末端的结构。 端粒的功能： 维持染色体的稳定性 维持DNA复制的完整性 端粒的结构特点 由末端单链DNA序列和蛋白质构成。 多次重复的富含G、C碱基的短序列。 TTTTGGGGTTTTGGGG… DNA聚合酶复制子链 进一步加工 端粒酶催化作用的爬行模型 第四节 逆转录和其他复制方式 Reverse Transcription 双链DNA是大多数生物的遗传物质。某些病毒的遗传物质是RNA。少数低等生物如M13噬菌体，它的感染型只含单链DNA。原核生物的质粒，真核生物的线粒体DNA，都是染色体外存在的DNA。这些非染色体基因组，采用特殊的方式进行复制。 逆转录酶 一、逆转录病毒的复制方式是逆转录 RNA DNA 逆转录(reverse transcription); 逆转录酶(reverse transcriptase)。 逆转录病毒细胞内的逆转录现象: RNA 模板 逆转录酶 DNA-RNA 杂化双链 RNA酶 单链DNA 逆转录酶 双链DNA RNA病毒在细胞内复制成双链DNA的前病毒(provirus)。前病毒保留了RNA病毒全部遗传信息，并可在细胞内独立繁殖。在某些情况下，前病毒基因组通过基因重组(recombination)，参加到细胞基因组内，并随宿主基因一起复制和表达。这种重组方式称为整合(integration)。前病毒独立繁殖或整合，都可成为致病的原因。 分子生物学研究可应用逆转录酶，作为获取基因工程目的基因的重要方法之一，此法称为cDNA法。 以mRNA为模板，经逆转录合成的与mRNA碱基序列互补的DNA链。 试管内合成cDNA cDNA ?complementary DNA? TTTT 逆转录酶 AAAA AAAA SI核酸酶 DNA聚合酶Ⅰ 碱水解 TTTT 二、逆转录的发现发展了中心法则 逆转录酶和逆转录现象，是分子生物学研究中的重大发现。 逆转录现象说明：至少在某些生物，RNA同样兼有遗传信息传代与表达功能。 对逆转录病毒的研究，拓宽了20世纪初已注意到的病毒致癌理论。 1.Meselson和Stahl利用15N及14N标记大肠杆菌的实验证明的反应机理是 A.DNA能被复制 B.DNA可转录为mRNA C.DNA可表达为蛋白质 D.DNA的半保留复制 E.DNA的全保留复制 2.合成DNA的原料是 A.dAMP，dGMP，dCMP，dTMP B.dATP，dGTP，dCTP，dTTP C.dADP，dGDP，dCDP，dTDP D.ATP，GTP，CTP，UPT E.AMP，GMP，CMP，UMP 3.DNA复制时，以序列5＇-TpApGpAp-3＇为模板合成互补结构A.5＇-pTpCpTpA-3＇ B.5＇-pApTpCpT-3＇ C.5＇-pUpCpUpA-3＇ D.5＇-pGpCpGpA-3＇ E.3＇-pTpCpTpA-5＇ 4. 在DNA复制中RNA引物的作用是 A.使DNA聚合酶Ⅲ活化 B.使DNA双链解开 C.提供5＇-P末端作合成新DNA链起点 D.提供5＇-OH末端作合成新DNA链起点 E.提供3＇-OH末端作合成新DNA链起点 5.关于大肠杆菌DNA聚合酶I的说法正确的是 A.具有3＇→5＇核酸外切酶活性 B.具有5＇→3＇核酸内切酶活性 C.是唯一参与大肠