体外受精入和早期胚胎培养.pptVIP

* 体外受精和早期胚胎培养 文昌中学 黄慧青 1978年7月25日世界首例试管婴儿 通过 使卵子和精子在 下成熟和受精，并通过培养发育成 后，再经移植产生后代的技术。 体外条件 人工操作 早期胚胎 概 念：---试管动物技术 过程： 第一步：体外受精 第二步：早期胚胎的培养 第三步：胚胎移植 （一）卵母细胞的采集和培养 对不同动物,采集卵母细胞的方法不同。 实验动物如小鼠、兔，以及家畜猪、羊等 采用的主要方法： 1、超数排卵法 用_________处理，使其排出更多的卵子(超数排卵），然后从_______中冲取卵子直接与获能的精子在体外受精。 对于大家畜或大型动物，如牛 采用的主要方法： 2、从屠宰场已屠宰母畜的_____中采集卵母细胞。 3、活体取卵法 也可以借助_____________、________或_______等工具，直接从活体动物的____中吸取卵母细胞。 采集的卵母细胞都要在体外经人工培养成熟，才能与获能的精子受精。 二、体外受精 促性腺激素 输卵管 超声波(B超)探测仪 内窥镜 腹腔镜 卵巢 卵巢 牛卵巢 B超活采仪 活体采集的牛卵母细胞 卵母细胞的成熟培养：培养液 调节PH值 CO2培养箱 2.精子的收集和获能 收集精子的方法： 假阴道法 手握法 电刺激法 （二）精子获能方法： 培养法: 化学诱导法: 精子在_________中获能 精子一定浓度的_____或_________________ ________________ ________________ (适用于啮齿动物、家兔和猪等) （适用于牛、羊等家畜） 获能液 肝素 钙离子载体A23187溶液 3.受精 获能的精子和培养成熟的卵子，一般情况下在 或 中完成受精过程。 获能溶液 专用受精溶液 三、胚胎的早期培养 盐类：无机盐和有机盐 营养物质：氨基酸、核苷酸 调节物质：维生素、激素 特有物质：动物血清 培养液 不同动物胚胎移植时间不同 桑椹胚或囊胚阶段 卵裂期或囊胚 8个或16个细胞阶段 胚胎培养发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。 牛、羊： 小鼠、家兔： 试管婴儿： 待解决的问题： 国产奶牛：年均产奶量3000公斤左右 国际良种奶牛：年均产奶量10000公斤左右 引进一头良种成年奶牛需要3万－5万元； 牛的生育率低，一头牛一胎只生一只，一生 只能生育四五次。 牛的生育率虽然很低，但是牛的卵母细胞 相当的多，其卵巢中卵母细胞数目要比一生 中排卵数多1000倍左右； 公牛产生的精子数目就更多了。 四、应用 方案一：大量引进（购买） 方案二：少量引进，自然繁殖 方案三：利用试管动物技术繁殖 胚胎移植 采集良种牛_______ ___________ 受精卵 良种牛的体外受精的_________ 本地受体牛 （________） 采集良种牛_______ ___________ 良种牛犊 卵母细胞 精子 培养到减二中期 精子获能 体外受精 早期胚胎 先决条件： 良种精子、卵子丰富 大量的本地牛（借腹怀胎） 胚胎移植 采集卵母细胞 体外培养 采集精子 体外获能 体外受精 早期胚胎培养 受体子宫 小 结 （时期： ） 1）超数排卵（试剂） 2）从屠宰的卵巢取卵 3）活体取卵（仪器） 方法①②③ （方法，试剂） （试剂） （培养条件、目的阶段） 成熟的卵子 获能的精子 MII中期 方法