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布鲁氏菌病实验室诊断研究进展
高明华樊庆德徐春光杨晓刚
(呼伦贝尔学院生命科学与化学学院内蒙古 呼伦贝尔 021008)
布鲁氏菌病(Brucellosis)是由布鲁氏菌(Brucella)引起地一种重要人兽共患病.根据致病性和宿主特异性,将布鲁氏菌分为 6个种19个生物型,即羊种布鲁氏菌(B.meltensis)、牛种布鲁氏菌(B. abortus)、猪种布鲁氏菌(B. suis)、绵羊附睾种布鲁氏菌(B.ovis)、犬种布鲁氏菌(B. canis)和沙林鼠种布鲁氏菌(B. neotomae).另外,从海洋动物中分离到在致病性和分子特征上有别于前6种地布鲁氏菌,定为海洋种布鲁氏菌(B. maris).据CDC报告,我国人布鲁氏菌病发生严重,2005~2007年全国布鲁氏菌病新发病人分别为18 416、19 013、21 901例,2008年1~10月新发病数已达27 264例,形势十分严峻.流行病学调查表明,感染来源主要是患布鲁氏菌病地羊,其次是牛及其他动物.并且具有疫区范围扩大、爆发点增多、典型病例增多、人群分布以农民和牧民为主等特点.?为有效预防和控制人和动物布鲁氏菌病,加强对动物布鲁氏菌病地检疫监测力度十分重要.为此本文就布鲁氏菌病实验室诊断方法研究进展作以综述.b5E2RGbCAP
1 免疫学诊断技术
1.1 血清凝集性试验
*基金项目:内蒙古自治区高等学校研究项目, NJzy08165布鲁氏菌病传统检测方法有血清凝集试验、全乳环状试验(MRT)和抗人免疫球蛋白试验(Coomb’s)等.经典血清凝集试验包括标准试管凝集试验(SAT)和平板凝集试验(PAT)等在发达国家已基本上停止使用,取代方法是缓冲布鲁氏菌抗原试验,如虎红平板凝集试验(RBT)等.在国际贸易中,缓冲布鲁氏菌抗原试验是牛、羊、猪种布鲁氏菌病地指定试验.乳牛MRT
*基金项目:内蒙古自治区高等学校研究项目, NJzy08165
1.2 补体结合试验(CFT)
CFT至今仍是布鲁氏菌病诊断地重要方法,是牛、羊及绵羊附睾种布鲁氏菌病国际贸易指定试验,并作为确诊用. HYPERLINK /sites/entrez?Db=pubmedCmd=SearchTerm=%22Adone%20R%22%5BAuthor%5Ditool=EntrezSystem2.PEntrez.Pubmed.Pubmed_ResultsPanel.Pubmed_RVAbstract Adone等[2]以无抗补体活性地羊种布鲁氏菌B115 R型菌株为抗原建立检测抗体地CFT(B115-CFT),并通过对RB51免疫地牛和水牛、绵羊附睾种布鲁氏菌感染地羊和犬种布鲁氏菌感染地犬血清中R型抗体进行检测表明,B115-CFT与RB51-CFT和HSE(布鲁氏菌热盐抽提物)-CFT相比,具有很高地敏感性和特异性.由于猪地补体会干扰豚鼠补体地作用,导致实验地敏感性降低38%~40%,因而CFT不适合猪种布鲁氏菌病地检测.DXDiTa9E3d
1.3 酶联免疫吸附试验(ELISA)
ELISA是一种与CFT效果相当地方法,操作更方便,既可以作为确定检测,又可以作为筛选和鉴别用.但只有用于牛布鲁氏菌病地ELISA是国际贸易指定地,这种ELISA方法不仅用于血清学诊断,还可用于乳汁检查.?用于其他种布鲁氏菌病检测地ELISA方法也是研究地热点. HYPERLINK /sites/entrez?Db=pubmedCmd=SearchTerm=%22Feldsherova%20AA%22%5BAuthor%5Ditool=EntrezSystem2.PEntrez.Pubmed.Pubmed_ResultsPanel.Pubmed_RVAbstract Feldsherova等?应用鼠抗流产布鲁氏菌脂多糖(LPS)地单克隆抗体建立了用于牛种布鲁氏菌、羊种布鲁氏菌和猪种布鲁氏菌鉴定地ELISA,该法具有高度地特异性和敏感性,同时不与小肠结肠炎耶尔森氏菌O:3、O:9及鼠伤寒沙门氏菌和土拉热弗朗西斯氏菌反应.检测抗原地最低浓度可达0.05-0.1 ng/mL. HYPERLINK /sites/entrez?Db=pubmedCmd=SearchTerm=%22Nielsen%20K%22%5BAuthor%5Ditool=EntrezSystem2.PEntrez.Pubmed.Pubmed_ResultsP
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