流式细胞仪操作步骤(FACSCalibur).docxVIP

一、开机程序： 检查鞘液桶和废液桶。确认鞘液充满状态（鞘液为鞘液桶体积的3/4位置，可以连续工作3个小时左右）、盖紧黑盖、管道畅通、废液桶有足够空间容纳本批标本排弃的废液。如果要添加鞘液，要先释放鞘液桶中气压。 依次打开流式细胞仪FACSCalibur稳压器、主机开关、电脑开关，打印机。 气压阀置于加压位置，待流式细胞仪处于STANDBY状态，做Prime，以排除管路中气泡。 二、运行FACSComp软件、检查仪器状况 制备三色标准微球样本。一般情况向1ml鞘液（或过滤PBS）中加入 1滴质控小微球，也可以根据实际情况调节浓度。 机器预热5 min，打开FACSComp软件，选择保持路径。选择所需校正内容，如果使用的微球是新一批产品要输入微球的批号。 在软件界面左侧Assay Selection选项中选择质控类型，即实验过程中是否需要清洗样品。 上样品，微球溶液上样之前要充分混匀。功能键设置在“RUN”。 仪器自动检查，并做电压、补偿等设置。 FACSComp软件运行完毕，显示结果通过测试。 做Set up。 打印校正结果，退出FACSComp程序。 备注：在质控过程中，如果提示收集细胞速度慢可以提高细胞收集速度，但是在调节灵敏度（Sens）时，一定要用“Low”的状态上样，保证仪器灵敏度的准确。在使用仪器过程中要养成好的习惯，在上样品过程中，仪器保持在“Low”