ISPM27限定有害生物诊断规程.PDFVIP

本诊断规程于 2016 年 1 月由标准委员会代表植物检疫措施委员会通过。 本附件为 ISPM 27 标准规定的一部分。 ISPM 27 限定有害生物诊断规程 DP 10：松材线虫（Bursaphelenchus xylophilus ） 2016 年通过 ；2018 年出台 目录 1. 有害生物信息2 2. 分类信息3 3. 检测4 3.1 树木中的检测4 3.2 使用昆虫诱捕器、诱集原木，以及在取自锯木厂与木材堆放场的样品中检测 5 3.3 在木材、木质产品与实木包装材料中直接检测5 3.4 从木材样品中分离线虫6 3.5 从媒介昆虫中分离线虫6 4. 鉴定7 4.1 形态学鉴定8 4.1.1 标本制备8 4.1.2 分种检索表9 4.1.3 松材线虫与相似种的比较13 4.2 分子鉴定14 4.2.1 ITS-PCR RFLP 15 4.2.2 常规PCR 17 4.2.3 实时PCR 19 4.2.4 基于RNA 的检测活松材线虫的分子检测方法21 4.2.5 LAMP 23 4.2.6 分子检测的对照24 4.2.7 PCR 结果的解释25 4.2.8 测序25 5. 记录26 6. 获取进一步信息的联系点26 7. 致谢27 8. 参考文献28 9. 图33 国际植物保护公约 DP 10-1 DP 10 限定有害生物诊断规程 1. 有害生物信息 松材线虫 （Bursaphelenchus xylophilus （Steiner 和 Buhrer ，1934）Nickle , 1970 ）是松树萎蔫病的致病因子。松材线虫据信最早发生在北美洲，广泛分布于 加拿大和美国（Ryss 等，2005 ），在墨西哥分布极为有限（Dwinell ，1993 ）。 北美洲的松树种类能够抵抗或者至少耐受松材线虫，但在北美洲，尤其是在较温暖 的美国南部地区种植的外来松树种类被该线虫侵染后会引起死亡。 据推测松材线虫是在 20 世纪初通过输自北美洲的木材传入日本，成为该国最具 危害的林业有害生物之一，今天仍然对松树（赤松 （Pinus densiflora ）、黑松 （P. thunbergii ）及琉球松（P. luchuensis ））造成严重损失。松材线虫还传入了 中国（包含台湾）和朝鲜；20 世纪 80 年代中后期在这些地区相继发生。1999 年， 欧洲（葡萄牙）首次在海岸松（P. pinaster ）上发现松材线虫，侵染后几个月内松树 相继因该线虫导致死亡（Mota 等，1999；Fonseca 等，2012 ）。葡萄牙和西班牙的 欧洲黑松（P. nigra ）与辐射松（P. radia