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第 卷 第 期 华 中 农 业 大 学 学 报
３４ ４ Vol．３４ No．４
年 月 ,
２０１５ ７ JournalofHuazhon A riculturalUniversit Jul２０１５８０~８３
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稀有放线菌小单孢菌与大肠杆菌
接合转移体系的构建
１ １ １ １ ２ ２ １
陈 鑫 杨振飞 朱 芮 肖延辉 郭 利 王晓丽 李晓华
/ , ;
中南民族大学生命科学学院 生物技术国家民委重点实验室 武汉
１． ４３００７４
,
湖北省襄阳市烟草专卖局 襄阳
２． ４４１００３
, ( ) ,
摘要 为将外源基因导入小单孢菌 建立小单孢菌 与大肠杆菌两亲接合转移方法 将包
Micromonosora
p
,
含小单孢菌内源质粒 复制区的 片段插入质粒 的 酶切位点 构建了能在大肠杆
pJTU１１２ ４．７kb pOJ２６０ BamHⅠ
, / ,
菌和小单孢菌中复制的穿梭载体 SCU２０７将质粒 SCU２０７转化大肠杆菌 ET１２５６７ UZ８００２再与小单孢菌
p p p
, , . :
LXH２０进行两亲接合转移 挑取接合转移子 并进行验证 结果表明 质粒 pSCU２０７通过大肠杆菌与小单孢菌
, ;
新鲜菌丝之间接合转移导入小单孢菌中 并可稳定遗传 大肠杆菌与小单孢菌新鲜菌丝之间的最佳接合转移体
积是 和 .
４０ L ４００ L
μ μ
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关键词 小单孢菌 接合转移 质粒 抗生素的敏感性 质粒稳定性
pSCU２０７
中图分类号 文献标识码
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