在乳酸乳球菌中表达外源谷氨酰胺转胺酶显着改善宿主菌-微生物学报.PDF

卷 期 ! ! 微 生 物 学 报 ’( )! /’ )! 年 月 #$$ % !#$ %’()(*(+$ ,-$ *+,+-. #$$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 在乳酸乳球菌中表达外源谷氨酰胺转胺酶 显著改善宿主菌好氧生长性能 傅瑞燕 陈 坚 李 寅 （江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室 无锡 #6!$04 ） 摘 要：为改善乳酸乳球菌的生长性能，以轮枝链霉菌染色体F/* 为模板，扩增得到编码谷氨酰胺转胺酶成熟酶 的基因 ，将其克隆到质粒 中，电转化乳酸乳球菌 ，获得乳酸乳球菌 （ ）（重组菌）。 !# G/H%6!% /H1$$$ /H1$$$ G8I$$6 在不控制 条件下，重组菌的胞外 显著高于对照菌 （ ）；前者的最高生物量可达 ，而后者 GJ GJ /H1$$$ G/H%6!% ! K 60,L I 只有 。在控制 为 的条件下，重组菌最高生物量为 ，对葡萄糖的菌体最高平均得率为 $ K0!,L I GJ 4 K M $ K 6 ! K70,L I 76K 6,L’(，而相同条件下对照菌最高生物量为# K4,L I，对葡萄糖的菌体最高平均得率为#7 K0,L’( 。由此表明，重组 菌与对照菌相比，好氧生长性能得到显著改善。可能的原因是 的活性表达升高了重组菌的胞内 ，原先用于 !# GJ 泵出胞内JN 所需的部分能量可能因此得到节省，这样相应增加了用于细胞生长的能量。 关键词：乳酸乳球菌，谷氨酰胺转胺酶，生长性能 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） O74 * $$$654#$1 #$$ $!5$6$5$4 乳酸菌是一类重要的工业微生物，被美国食品 制，即通过合成碱性物质增加胞质的缓冲能力。已 与药品安全管理局（ ）认定为 （ 经发现，当乳酸乳球菌的胞外 （ ）从 降到 8F* PQ*RS P3?3E9((5 GJ GJ’ K# Q3,9EA3A *- R9D3 S=BE’’E,9?=--），是目前生产食品级 ! K7 时，葡萄糖的消耗速率不再增加，但氨基酸代谢 代谢物最理想的细胞工厂，其模式种乳酸乳球菌 作用得到增强。通过脱氨基作用，消耗胞内的JN ， ［ ］ （ ）已被广泛用于代谢工程的研 4 V % $%’’() *%+) 从而升高GJ= 。然而，这种抵抗酸胁迫的机制只 ［］ 6 究 。乳酸乳球菌生长时伴随着乳酸的产生。由产