人源性Rab32荧光融合蛋白表达载体的构建及鉴定-新乡医学院学报.PDF

33 9 Vol． 33 No． 9 第 卷 第 期 新乡医学院学报 2016 9 Journal of Xinxiang Medical University Sep． 2016 7·45 · 年 月 欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁氉 欁 氉 本 : ， ， ， ． Ｒab32 ［J］． 欁 文引用 李宏文 张艳红 邓云华 等 人源性 荧光融合蛋白表达载体的构建及鉴定 新乡医学院学 欁 【 】 基础研究 ，2016 ，33 (9) 欁 报 :745-747 ，751． DOI :10． 7683 /xxyxyxb． 2016． 09． 001． 氉欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁氉 人源性Ｒab32 荧光融合蛋白表达载体的构建及鉴定 1 1 1 2 李宏文 ，张艳红 ，邓云华 ，张彩娥 (1． ， 430000 ;2． 华中科技大学同济医学院附属同济医院皮肤科 湖北 武汉 华中科技大学同济医学院附属同济医院 ， 430000) 麻醉科 湖北 武汉 : Ｒab32 pEGFP-Ｒab32 ， Ｒab32 摘要 目的 构建人源性 荧光融合蛋白表达载体 并观察 在人黑素细胞瘤细胞系 A375 。 A375 ＲNA ， cDNA ， Ｒab32 ， 中细胞定位情况 方法 收集并提取 细胞中的总 反转录成 以特异性引物扩增 片段 XhoI KpnI (PCＲ) pEGFP-C3 ， 、 经 和 双酶切聚合酶链反应 产物和 表达载体 酶切产物经胶回收 连接后转化至感受态大 DH5a ， PCＲ 、 ， 。 肠杆菌 中 挑取单克隆菌落进行菌液 鉴定 酶切鉴定和测序分析 以确定表达载体构建正确 将构建的重 A375 ，Western blot Ｒab32 ， 。 组质粒转染 细胞 检测细胞中 表达水平 激光共