实验三-血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳.pptVIP

血清蛋白质醋酸纤维素 薄膜电泳 一、目的 掌握醋酸纤维薄膜电泳的操作。 了解电泳技术的一般原理。 二、原理 带电质点向着与它所带相反电荷的电极移动的现象称为电泳。带电质点之所以能在电场中向一定的方向移动，并具有一定的移动速度，是取决于带电质点本身所带的电荷、电场强度、溶液的 pH等因素。蛋白质分子在溶液中的电泳是由于蛋白质的分子具有一些自由的可解离的基团如-COOH、-NH 2、-OH等，因而在某种pH值溶液中蛋白质分子就带有一定的电荷。一个混合的蛋白质样品由于各蛋白质的等电点不同，在相同的pH溶液中所带的电荷性质不同，电荷的数目不同，在电场中各种蛋白质泳动的方向和速度也不同，从而使蛋白质混合样品得到分离。 血清中含有白蛋白、α-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白等，各种蛋白质由于氨基酸组分、立体构象、相对分子质量、等电点及形状不同（见下表），在电场中移动速度不同。由表可知，血清中5种蛋白质的等电点大部分低于pH7.0所以在缓冲液（pH值8.6）中，它们都电离成负离子，在电场中向阳极移动。 蛋白质名称 白蛋白 α1–球蛋白 α2–球蛋白 β–球蛋白 γ–球蛋白 等电点（pI） 4.88 5.06 5.06 5.12