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免疫细胞化学染色后的电镜标本处理 医学院解剖 与组织胚胎学系 免疫电镜技术 是用电子显微镜观察免疫细胞化学标记的细胞和组织超微结构的技术。 是在免疫细胞化学技术和电镜技术的矛盾结合点上形成的新方法。 免疫组织化学技术与电镜技术的矛盾点: 免疫细胞化学: 破坏细胞膜增强抗体的穿透性, 最大限度地标记抗原！ 电镜技术：最大限度地固定组织保存细胞的膜性结构，使细胞超微结构清晰美观。 两者的矛盾结合点： 既良好地标记了抗原又完美地保留了膜性结构 振动切片机 40 μm 免疫染色 树脂包埋 脑（for example) vibrating-blade microtome切片 超薄切片60-80 nm、电子染色（醋酸铀/枸橼酸铅） 电镜观察照相 锇酸固定 ultramicrotome Protocol for immunohistochemistry 1. 将切片裱于蛋清涂布的载玻片上，充分晾干。入0.1 mol/L PB。漂洗5 min×3次。 2. 在湿盒和通风厨中，每张切片加于2%锇酸60～80 μl。固定1.5～2h。漂洗5 min×4次。 3. 经50%、70%、80%、90%、100%（3次）各级酒精脱水，每级10 min。 4. 在切片表面注入少量Epon/丙酮液（Epon：丙酮 = 2：1），用注满Epon液的塑料胶