破骨细胞体外培养生存数的观察与鳗鱼降钙素的影响-中国骨质疏松杂志.PDF

中国骨质疏松杂志 1996午l2月第2卷第4期 l3 破骨细胞体外培养生存数的观察 与鳗鱼降钙素的影响 于明香 金慰芳 王洪复 摘要 应用改良的Fenton方法由出生24小时内的新生Wistar大鼠分离破骨细胞(()c)培养于盖琏片与骨片 上t并应用改良的VanDeWijngaert和Mostafa方法对培养在骨片上的OC进行TRAP染色，观察体外培养OC的 形态与生存时间。培养于骨片上的OC生存时间可长达240小时。l×10。mol／L鳗鱼降钙索能明显减少体外培养 的多棱OC生存数t但对单棱前Ot2数授有明显影响。 关键词 破骨细胞 细胞培养 TRAP 鳗鱼降钙紊 SurvivaInumbersofosteoclasts culturedjnvitroandeffectofeeIcalcitonin YuMingxiangtJinWeifangandWangHongiu (InstituteofRadiationMed~ine，ShanghNMedicalUniversity Shanghai200032，China) Abstract WithmodifiedFenton smethodttheosteodastsweredisaggregated~rorntheone—day—oldneonatal Wistarratlongbonesandsettledontoglassorboneslices．WealsousedmodifiedVandeWijngaertandMosta{a SmethodtOstaintheTRAPofosteodastsculturedonhoneslicesandobservedthemorphologyandsurvivalperiod 0fthecu】turedosteoclastsTheosteoc】a scuI1uredOnhoneslicesCOUIdsurviveasIongas240hours．Theeelal— toninofl×l0_。moI／lCOIlIddecreasethestlrviva】nulnbersofmultinudeatedosteoc】asts．hutdidnot自ffectthe survlva】numbersofm0 ucleatedpreosteoclastS Keywords 0steoclasts Ce】jCUhtlre TRAP Calcitonin 骨质疏松症防治药物的研究已越来越引起 可清晰观察体外培养OC的形态与鳗鱼降钙素 人们的重视。研究作用于破骨细胞(Osteoclast， (EelCalcitonin，eCT)对OC生存数的影响，特 OC)的药物是防治骨质疏松症的重要环节。然 报道如下。 而，由于体外培养的OC数量少、生存时间短、 l材料与方法 且不再增殖，同时混入的其他细胞能迅速增殖， 应用普通染色技术，如HE、Giemsa、甲苯胺蓝 1．1动物 出生24小时内的Wistar大鼠，本 等难以将OC与其他细胞清晰区分，因而在体 所实验动物房提供，沪医实验动物合格证：34。 外研究抑制OC的药物颇为困难。本文应用改 1．2 试剂 MEM与胎牛血清(GIBCOBRL， 良的Fenton方法lj可延长体外培养OC的生 USA)，HEPES(中国科学院上海生物化学研究 存时间，并应用抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate 所)，萘酚AS—BI磷酸盐(Koch—LightLTD， ResistantAcidPhosphatase，TRAP)染色技术 England)，副品红(上海新中化学厂)。N，N一二 甲基甲酰胺(上海试剂一厂)，鳗鱼降钙素(益钙 作者单位：200032 上悔医科大学放射医学研究所碗士研究 宁，日本旭化成株式会社)。 生现在泰山医学院工作(于嘲香)研究生导师(王社}复)