免疫胶体金快速诊断技术的临床应用与质量控制.pdfVIP

中国医学装备2013年5Jq第10卷第5期ChinaMedicalEquipment2013MayVo1．10NO．5 学术论著 l 免疫胶体金快速诊断技术的临床应用与质量控制 、 张书永① [文章编号】1672—8270(20l3)05—0037—03 [中图分类号】R446．6 [文献标识码】A [摘要】目的：免疫胶体金技术(ICGT)是继免疫荧光、放射性免疫和酶联免疫吸附法之后发展起 来的固相标记免疫测定技术，了解ICGT在临床快速诊断的应用，提出在此实验过程中的质量控 制建议。方法：以胶体金作为示踪标志物，应用于抗原抗体反应中。通过文献检索与归纳，对 目 前胶体金免疫技术的临床诊断、应用和常见问题进行总结。结果：医学检验中应用的免疫胶体金 快速检测技术主要方法—一陕速斑点免疫金渗滤法(DIGFA)和胶体金免疫层析法(GICA)均以微孔 滤膜为载体，该技术具有敏感性和特异性高、操作便捷及可快速判读结果等特点。结论：ICGT 因其操作简便、快速诊断的特点，适用于广大基层医疗单位并能在现场进行检测和诊断。 [关键词】免疫胶体金技术；快速临床检测；质量控制，示踪标志物 DOI：10．3969／J．ISSN．1672-8270．2013．OS．OU 免疫胶体金标记技术是指以胶体金作为示踪标 度的特性，在显微镜下金标蛋白结合处可见黑褐色颗 志物，应用于抗原抗体反应中的一种新型免疫标记技 粒，当这些标记物在相应的配体处大量聚集时，可见 术。20世纪70年代初 ，Faulk等应用电镜免疫胶体金 红色或粉红色斑点，因而可用于定性或半定量的快速 染色法(IGS)观察沙门菌，首次把胶体金引入免疫化学 免疫检测，广泛应用于免疫学、组织学、病理学和细 领域，随后40年的发展，免疫胶体金标记技术的不断 胞生物学等领域。 成熟使之已不仅广泛应用于电镜水平研究、光显微细 目前 ，该技术 已广泛应用于被动凝集试验、光 胞化学、免疫沉淀及蛋白质染色技术上，并且被引进 镜染色、免疫印迹、流式细胞术、液相免疫测定、斑 免疫诊断商业化领域中，尤其是在医学检验的快速诊 点金免疫渗滤及免疫层析等。免疫胶体金为基础研发 断方面显现出了巨大的优势。 生产的用于疾病检测和诊断的快速检测法主要分两大 1免疫胶体金技术(Irrrmm colloidalfindteehni~ ，IC6T) 类 ：①渗滤法 ，或称为滴金免疫渗滤实验 ，可以理解 的基本原理 为一种以免疫胶体金代替酶标抗体的斑点酶联免疫吸 胶体金是由氯金酸(HAuC1)在还原剂如 白磷 、 附剂测定(enzymelinkedimmunosorbentassay， 抗坏血酸、枸橼酸钠及鞣酸等作用下，聚合成为特定 ELISA)法；②免疫层析法，是一种侧向横流形式的免 大小的金颗粒 ，并由于静电作用成为稳定的胶体状 疫实验 “。 态，故称为胶体金。胶体金颗粒在弱碱环境下带负电 2 免疫胶体金快速诊断技术的临床应用 荷 ，可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合， 目前 ，医学检验 中应用 的免疫胶体金快速检 由于这种结合是静电结合，因此不影响蛋白质的生物 测技术主要方法——快速斑点免疫金渗滤法 (dot 特性。胶体金可与蛋白质结合以外 ，还可与许多生物 immunogoldfiltration assay，DIGFA)~[I胶体金 大分子结合，如与葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白、毒 免疫层析 (gold—immunochromatography，GICA) 素、糖蛋白、酶、抗生素和激素等多种物质非共价结 法均以微孔滤膜为载体 ，包被 已知抗原或抗体 ，加 合，从而使其成为免疫反应的优良标记物。 入待检标本后，经滤膜的毛细管作用或渗滤作用 根据需要制备大小不同，胶体金颗粒直径为 使标本 中的抗原或抗体与膜上包被的抗体或抗原结 1～150nm，为桔红色到紫红色，且具有高电子高密 合，再用胶体金标记物与之反应形成红色可见结果 ①河北钢铁集团邯钢职工医院检验科 河北 邯郸 056001 ZHONGGUOY}×UEZHUANGBEl 37 学术论著