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血细胞分析仪及其临床应用滨州市人民医院检验科张 芳 血液分析仪检测原理 仪器基本结构 机械系统 电学系统 光学系统 检测方法：电阻抗法、光散射法 两大功能：细胞计数、细胞分类 库尔特原理 “当一个不良导体颗 粒，例如血细 胞，通过两个电极之间 时 ，导 致电 路的电 阻抗发生变化，产生脉冲电信号。” 脉冲次数—细胞数量，脉冲大小—细胞体积。 电阻抗原理示意图 1、电阻抗法血细胞分析技术 （1）电阻抗原理(principle of electrical impedance)，又称库尔特原理（Coulter principle） 电阻抗原理 血细胞相对非导电，悬浮在电解质溶液中受负压吸引通过计数小孔时，引起电阻瞬间变化产生脉冲信号，脉冲振幅代表细胞体积，脉冲数量即细胞个数。 用于红细胞、白细胞、血小板计数和体积测定 （1）电阻抗法白细胞检测原理 35-450fl范围内分析白细胞（计数和 体积三分类） 白细胞通过小孔 白细胞体积 生理状态下：单核细胞嗜酸细胞中性粒细胞嗜碱细胞淋巴细胞 溶血素处理后：中性粒细胞嗜酸细胞单核细胞嗜碱细胞淋巴细胞 　三分类原理： 白细胞经溶血素处理，胞质渗出，细胞皱缩，胞膜紧裹核与颗粒，体积发生变化 第一群（35～90fl）小细胞区：淋巴细胞（体积最小，一般在35～90fl）。 第二群（90～160fl）是单个核细胞区（中间细胞）：包括单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、原始、幼稚细胞、异常细胞等 第三群（160fl）大细胞区：嗜中性粒细胞（体积最大，一般在135-350fl）。 仪器组成 1.信号发生器 2.放大器 3.阈值调节 4.甄别器 5.整形器 6.技术系统 （2）电阻抗法红细胞检测原理 红细胞计数和血细胞比容测定 36-360fl范围内计数红细胞 红细胞通过小孔 血红蛋白检测原理 溶血剂破坏红细胞释放血红蛋白，Hb与溶血剂某些成分结合成血红蛋白衍生物，特定波长下比色，吸光度变化与血红蛋白含量成正比 ICSH和WHO推荐氰化高铁血红蛋白法 （3）电阻抗法血小板检测原理 血小板计数：2-20fl范围计数为血小板 因体积较小，可与红细胞在一个系统中进行检测。 直方图在2～30fl（不同仪器范围有差异）。 血小板平均体积（mean platelet volume, MPV）。 检测原理： 组合应用 ☆电学 ☆光学 ☆细胞化学等 从三分群到五分类 三分群： 淋巴细胞 单个核细胞 中性粒细胞 五分类： 淋巴细胞 单核细胞 中性粒细胞 嗜酸细胞 嗜碱细胞 3、光散射法血细胞分析方法 （1）容量、电导、光散射（VCS）测量法 （2）电阻抗与射频技术联合检测法 （3）光散射与细胞化学技术联合检测法 （4）多角度偏振光散射检测法 （1）容量、电导、光散射（VCS）测量法 白细胞接近原态的分析 Scatter Pak双试剂系统的作用 溶血剂(E-lyse): 溶解红细胞 终止剂(S-lyse): 令溶解作用停止，并使白细胞恢复到“接近原态” 接近原态的WBC分析 体积检测(V) 细胞内部结构检测(C) 细胞颗粒特性检测(S) VCS检测 五分类VCS技术 运用V、C、S三种探针,在流式通道的某一位点,对通过的单列白细胞，进行逐个的、同时的、三重的检测，以及三维分析,以确定其亚群性质。 V-低频波，分析细胞体积； C-高频波，分析细胞核型； S-激光，分析细胞的颗粒特性。 三维细胞定位 VCS三维分析的技术特点 接近原态的白细胞分析 一个分类试剂包 增强型流式通道，VCS直接、同时、三重检测 分析细胞的视角与手工相似 真正的三维检测 VCS，汇集最全面的物理检测工具 三维分析的高分辨率 (256 ? 256 ? 256) 白细胞五项分类 10多种异常细胞的检测 血液分析仪的不足 起筛查作用 识别异常细胞和幼稚细胞有局限性 识别血液寄生虫能力不足 血涂片显微镜形态学检查补充不足 （2）电阻抗与射频法 （能透入细胞内，测量核的大小及颗粒的多少）： ①嗜酸性粒细胞检测系统 ②嗜碱性粒细胞检测系统 ③5种白细胞分类检测系统：直流电（direct current，DC）为横坐标，以射频（radio frequency ，RF）为纵坐标的二维分析图。 ④幼稚细胞检测系统： （3）激光与细胞化