脂类的分析极性溶於极性LikeDissolvesLike↑极性越小者越先.docVIP

10-4 脂類的分析 極性溶於極性Like Dissolves Like 均質化在氯仿、甲醇與水中 均質化在氯仿、甲醇與水中 ↑極性越小者越先溶出。 TLC(薄層層析法) 基本原理 溶劑樣本(moving phase) 通過吸附劑(stationary phase)時，因為樣本中含有的混合物質不同，跟吸附劑所產生的親合力也不同。所以在通過時的速率也就不一樣，以此能判斷或分離樣本中所含的物質。 CC(管柱層析法) 管柱層析除了在使用器材與薄層層析法不同之外,其最大的差異,在於管柱層析法所處理的量遠大於薄層層析法,約以克來計算。因為層析管柱填充的吸附劑量遠大於TLC片,且管柱的大小、長短可以依欲分離的物質量的多少而選擇,因而管柱層析法可用於分離比較大量的物質,而TLC分離的量比較小,約為毫克以下。 hplc (high pressure liquid chromatography)簡稱液相層析儀主要功用1.在樣品液相的狀況下；藉由移動向(mobile phase)跟固定相(分析管柱)，將樣品內的成分分離出來。2.分離出來的樣品可以藉由收集器予以收集。3.一般分析的條件多為4C~80C4.樣品一般無法汽化；而且帶有雙鍵或苯環。5.只能定量(而且需做檢量線)；若要定性則須由RETATION TIME(滯留時間)去判定。6.偵測器有 UV/ DAD(PDA)/RI/FLD/ELCD…也可接質譜儀(MS) GC/MS (gas chromatography/ mass detector) 氣相層析質譜儀主要功用1.樣品必須能汽化(150C~450C)；經由注射口；分離管柱(毛細管柱)到達質譜儀檢測。2.分離出來的樣品可藉由質譜儀所設定的分子量，予以偵測。3.偵測出的樣品，可由內建圖庫(library)匹對，得到相似度%；予以判定可能的成分為何。4.還是須配置標準品作定量，但是針對揮發性有機物可由幾種樣品做半定量(ION RESPONSE去判定)5.分析樣品的分子量一般介於1.0~1050 AMU 問題 為何脂質在管柱層析(吸附性)下極性較小者會先流出? ANS: 一般極性大的的物質被吸附較多，而極性較小的物質因不易被吸 附，因此較易向下流動。 比較GC(氣相層析)與HPLC(管柱層析)的優缺點 ANS: GC(氣相層析儀)和HPLC(高效能液相層析儀)，它們最大的相異處就是GC是使用氣體做為移動相，而HPLC則是使用液體溶劑做為移動相。 GC是用來分析小分子(分子量較小的化合物)，HPLC可以分析較大分子(分子量較大的化合物)。 層析法的基本機制為何? 極性相似的兩分子間，其親和力較強。 極性溶於極性。 非極性溶於非極性。