聚胺与DNA相互作用的相图-应用化学.PDF

第24卷第11期 应用化学 v01．24No．“ CHINESE OFAPPLIEDCHEMISTRY NOV．2007 2007年11月 JOURNAL 聚胺与DNA相互作用的相图 潘华4 张剑“ 张高勇4孙彦庆。 (4中国日用化学工业研究院表面活性剂国家工程研究中心太原； ‘无锡杰能科生物工程有限公司 上海200051；。亚太区产品研发中心广州雅芳镧造有限公司广州) 摘要利用相图方法研究了聚胺(PA)与DNA的相互作用，初步考察了NaCl对精胺与DNA相互作用的影 响。研究结果表明．聚胺与DNA之间不仅存在着强烈的静电作用，同时聚胺与DNA碱基对之间也存在着相 025 retool／L)时就开始出现浊度，而在相同的条件下，亚精胺(SPD)- 互作用。在较低的精胺(SPM)浓度(n DNA体系和盐酸胍(GD)一DNA体系在聚胺浓度高达10mmol／L时浊度曲线仍无明显变化；SPD—DNA体系与 GD．DNA体系的A蛳曲线相比，前者随着聚胺浓度的增加吸光度逐渐下降，说明SPI)与DNA作用强于GD；由 此可见聚胺所带正电荷越多，其与DNA的作用越强，水溶液条件下亚精胺(SPD)和GD与DNA间有较弱的相 互作用．但不能使DNA产生相分离；加入NaCI后，由于外加电解质的静电屏蔽效应，SPM与DNA之间的相互 作用减弱。NaCI浓度越大，二者之间相互作用越弱．SPM—DNA体系相用曲线的线性相关性越低。 关键词聚胺+DNA．相图．相互作用 中图分类号：0641．3 文献标识码：A 文章编号：1000-0518(2007)11—1250-05 将重组的DNA缩拢成致密的小球送人细胞的过程是实现基因转染的关键步骤“j。某些小分子在 水溶液中达到一定浓度、温度或改变溶剂性质时，就有可能与DNA相互作用形成复合物，并诱导DNA 构象发生由线圈到小球的转变。前文”“1对阳离子表面活性剂、非离子表面活性剂、两性表面活性剂与 合物的总称。它们有利于DNA进入噬菌体头基，对于维持细胞内DNA的压缩状态起着重要作用。研究 表明口。7】．聚胺导致天然DNA分子压缩和聚集，并对生物学上重要的包裹过程(如染色体结构的组织) 提供有用的模型。国外已用多种方法对聚胺与DNA相互作用进行了研究，如圆二色谱法…、核磁共 振‘“、傅立叶拉曼变换光谱法【9】、原子力显微镜””等，至今已建立了多个聚胺与DNA相互作用的模型。 但国内关于二者相互作用方面的研究尚属空白。分子水平研究涉及的是聚胺对单个大分子的影响，但 这种微观过程相当复杂，而且仅靠微观研究是远远不够的。作为宏观研究手段的相行为不但可以给出 较直观的分子相互作用信息，并且可以为分子水平研究提供理论依据。而且目前有关此类工作在国内 外均尚未见文献报道。本文利用相图的方法从宏观角度对聚胺．DNA的相互作用进行了研究，以期望获 得体系内部的分子水平信息，为聚胺的应用提供理论依据。 1实验部分 1．1试剂和仪器 精胺(SPM)、亚精胺(SPD)、盐酸胍(Guanidine 度均99％；鲑鱼精DNA(SalmonSperm DNA纯度：A。以Ⅲ1．8，符合实验要求；NaCI为分析纯试剂；水为去离子二次水。 UVl600型紫外可见光分光光度计(北京瑞利分析仪器公司)。 1．2实验方法 所用聚胺结构如下： 2006．12-28收藕．20074)4-28修回 国家自然科学基金重点资助项目 通讯联系人：张剑。女．博士．高级工程师；E-mall：panhuapeggy@163．咖；研究方向：表面活性剂的物理化学研究 第11期 潘华等：聚胺与DNA相互作用的相图 1251 SPM：tNHCl-，／＼v／＼；沙V＼／N!A八只_H， H2 H2 C1一