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高考生物实验总结
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纪超(易题库高中生物教研员)
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实验1:观察DNA和RNA在细胞中的分布
1、原理
(1)真核细胞的DNA主要分布在细胞核内,RNA主要分布在细胞质中。
(2)甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿对DNA亲和力强,使DNA显现绿色,吡罗红对RNA的亲和力强,使RNA呈现红色。用甲基绿、吡罗红的混合染色剂将细胞染色,可显示DNA和RNA在细胞中的分布。
(3)盐酸的作用:盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞;盐酸使染色质中的DNA与蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合。
2、试剂:0.9%的NaCl溶液(维持细胞形态);8%的盐酸;吡罗红甲基绿染色剂(现配)
3、流程:制片→水解→冲洗→染色→观察(染色均匀、色泽浅)
4、结论:细胞质呈红色(面积大),细胞核呈绿色。
5、高频考点:选择人口腔上皮细胞、洋葱内表皮细胞等无色的细胞,防止颜色干扰
【高考这样考】
【12安徽】某同学以新鲜洋葱鳞片叶内表皮为材料,经不同处理和染色剂染色,用高倍显微镜观察。下列描述正确的是
A.经吡罗红甲基绿染色,可观察到红色的细胞核
B.经吡罗红甲基绿染色,可观察到绿色的细胞质
C.经健那绿染色,可观察到蓝绿色颗粒状的线粒体
D.经苏丹Ⅲ染色,可观察到橘黄色颗粒状的蛋白质
【解析】用新鲜洋葱鳞片叶内表皮做材料,经吡啰红甲基绿染色,DNA被染成绿色,RNA被染成红色,因此可观察到细胞质被染成红色,细胞核被染成绿色;苏丹Ⅲ可将细胞内的脂肪颗粒染成橘黄色;健那绿可将活细胞内的线粒体染成蓝绿色
【答案】C
实验2:检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质
1、原理
(1)还原糖(葡萄糖、果糖、麦芽糖)+斐林试剂(水浴加热)→砖红色沉淀
(2)脂肪+苏丹Ⅲ→橘黄色;脂肪+苏丹Ⅳ→红色
(3)蛋白质+双缩脲试剂→紫色反应
2、还原糖的检测
(1)实验材料:还原糖含量高,白色或近于白色,如苹果、梨、白萝卜。
(2)试剂:斐林试剂(甲液:0.1g/mL的NaOH溶液,乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液),现配现用。
(3)步骤:向试管内注入2mL待测组织样液→加入斐林试剂1mL(甲液和乙液等量混合均匀后再注入)→50~65℃水浴加热约2min→观察颜色变化(蓝色→砖红色沉淀)
(4)原理:NaOH和CuSO4反应生成Cu(OH)2,被还原糖还原成Cu2O
3、脂肪的检测
(1)实验材料:脂肪含量越高的组织越好,如花生的子叶。
(2)步骤:
方法一:向待测组织样液中滴加3滴苏丹Ⅲ染液,观察样液的颜色
方法二:制作子叶临时切片:制备最薄的切片→滴2~3滴苏丹Ⅲ染液染色→2~3min后吸去染液→滴加体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精→滴1滴蒸馏水→盖上盖玻片→低倍镜找最薄处→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒
4、蛋白质的检测
(1)试剂:双缩脲试剂(A液:0.1g/mL的NaOH溶液,B液:0.01g/mL的CuSO4溶液)
(2)步骤:向试管内注入2mL待测组织样液→加双缩脲试剂A液1mL,摇匀→加双缩脲试剂B液4滴→观察
(3)原理:在碱性条件下,Cu2+与肽键反应生成紫色的络合物。
【高考这样考】
【14广东】油菜种子成熟过程中部分有机物的变化如图所示,将不同成熟阶段的种子匀浆后检测,结果正确的是
选项
取样时间
检测试剂
检测结果
A
第10天
斐林试剂
不显色
B
第20天
双缩脲试剂
不显色
C
第30天
苏丹Ⅲ试剂
橘黄色
D
第40天
碘液
蓝色
【解析】第10天,有可溶性糖存在,斐林试剂检测会出现砖红色沉淀;细胞中含量最多的有机物是蛋白质,所以在第20天用双缩脲试剂会出现紫色;第30天,细胞中脂肪含量较高,用苏丹Ⅲ试剂可将脂肪染成橘黄色;第40天,细胞中没有淀粉,所以用碘液不会出现蓝色
【答案】C
【12广东】分析下表,可推测
溶液
双缩脲试剂
碘液
斐林试剂
甲
+
-
-
乙
-
++
-
甲、乙混合
+
+
+
注:“+”显色,“++”显色更深;“-”不显色。
A.甲溶液含有淀粉 B.乙溶液含有还原糖
C.混合溶液不含淀粉 D.混合溶液含有淀粉酶
【解析】甲溶液加入双缩脲试剂显色,说明含有蛋白质,遇碘液不变蓝色说明不含淀粉;乙溶液加碘液显色较深,说明含大量的淀粉,而加入本尼迪特试剂不显色,说明不含还原性糖;甲溶液中只含蛋白质,乙溶液中只含淀粉,都不含还原性糖,但混合后却有还原性糖存在,说明混合溶液中含有能将淀粉分解成还原性糖的淀粉酶;甲、乙混合溶液中分别加入双缩脲试剂、碘液和本尼迪特试剂都能显色,说明同时含有蛋白质、淀粉和还原性糖
【答案】D
【08广东】双缩脲试剂可以鉴定蛋白质,是由于
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