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3、蛋白质的鉴定原理: 在碱性溶液(NaOH)中,双缩脲(H2NCO-NH-CONH2)能与Cu2+作用,可形成紫色或紫红色的络合物,这一反应称双缩脲反应。蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键(两个相邻的肽键与双缩脲结构相似),因此又称为肽键反应。 二、试剂: 1、斐林试剂 A液 质量浓度0.1g/mL的NaOH溶液 B液 质量浓度0.05g/mL的CuSO4溶液 2、双缩脲试剂 A液 质量浓度0.1g/mL的NaOH溶液 B液 质量浓度0.01g/mL的CuSO4溶液 3、苏丹Ⅲ:0.1g苏丹Ⅲ干粉,溶于100mL体积分数为95%的酒精中,待全部溶解后再使用。 验证鉴定类——检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质 1、原理: 叶绿体中色素能溶解在有机溶剂丙酮或无水乙醇——提取色素 各色素在层析液中的溶解度不同,随层析液在滤纸上扩散速度不同——分离色素 2、步骤: (1)提取色素 研磨 (2)制备滤纸条 (3)画滤液细线:均匀,直,细,重复若干次 (4)分离色素:不能让滤液细线触及层析液 (5)观察和记录: 滤纸条上从上到下依次为: 胡萝卜素 (橙黄色)、叶黄素 (黄色)、叶绿素a (蓝绿色)、叶绿素b (黄绿色) 验证鉴定类——叶绿体中色素的提取和分离实验 验证鉴定类 实验名称 鉴定 对象 试剂及显 色结果 水浴加热 实验材料 一般程序 生物组织中糖类的鉴定 淀粉 碘液(蓝色) 不需要 脱色的叶片 取材→材料处理(制组织样液或装片)→加鉴定剂→观察 还原糖 斐林试剂(砖红色沉淀) 需要 含还原糖高的白色或近于白色的植物组织、尿液、血浆等 生物组织中蛋白质的鉴定 蛋白质 双缩脲试剂(紫色) 不需要 豆浆、牛奶、 鸡蛋清等 DNA的粗提取和分离 DNA 二苯胺 (蓝色) 需要 (沸水浴) 鸡血红细胞、猪肝细胞、植物叶肉细胞等 (11年新课标卷)6.下表是根据实验目的,所需选用的试剂与预期的实验结果正确的是 例题分析 实验目的 试剂 预期的实验结果 A 观察根尖分生组织细胞的有丝分裂 醋酸洋红 染色体被染成紫红色 B 检测植物组织中的脂肪 双缩脲试剂 脂肪颗粒被染成红色 C 检测植物组织中的葡萄糖 甲基绿 葡萄糖与甲基绿作用,生成绿色沉淀 D 观察DNA和RNA在细胞中的分布 斐林试剂 吡罗红 斐林试剂将DNA染成绿色,吡罗红将RNA染成红色 A (2012广东)3. 分析下表,可推测 注:“+”显色,“++”显色更深;“-”不显色 A.甲溶液含有淀粉酶 B.乙溶液含有还原糖 C.混合溶液不含淀粉 D.混合溶液含有淀粉酶 例题分析 D 溶液 双缩脲试剂 碘液 斐林试剂 甲 + - - 乙 - ++ - 甲、乙混合 + + + 一、实验原理 1、新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶,Fe3+是一种无机催化剂,它们都可以催化过氧化氢分解成水和氧。 2、分别用一定数量的过氧化氢酶和Fe3+催化过氧化氢分解成水和氧,可以比较两者的催化效率。 3、酶作为生物催化剂,其催化效率比无机催化剂的效率要高出107-1013倍,体现其高效性。 4、经计算,用质量分数为3.5%的氯化铁溶液和质量分数为20%的肝脏研磨液做实验,每滴氯化铁溶液中的Fe3+数,大约是每滴研磨液中过氧化氢酶分子数的25万倍。 探究设计类——比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率 二、实验材料选用 制备质量分数为20%肝脏研磨液 : 新鲜的猪肝20g+水100mL,研磨 改进: 将称量好的新鲜肝脏碎块和水放入薄厚、大小适宜的塑料袋中,一手捏住封口,另一手的挤压(手研)被包裹的肝脏碎块,直至研磨成匀浆后,用大头针在塑料膜上扎上许多小孔,将匀浆从小孔挤出来,即可用于实验。(也可以将滤液再过滤一次) 探究设计类——比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率 三、注意事项 1、猪肝或其它动物肝脏一定要新鲜 2、为增加对照效果,可适当降低氯化铁溶液浓度 3、最好使用20×200mm的大试管 4、可再增加一组对照:把肝脏研磨液煮沸后进行对照实验 探究设计类——比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率 一、实验原理 1、淀粉和蔗糖都是非还原糖 葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原糖 2、淀粉酶能催化淀粉水解,不能催化蔗糖水解 3、斐林试剂能鉴定溶液中有无还原糖。 深入原理 在正常条件下,萌发的种子胚内产生赤霉素,它刺激了糊粉层产生α—淀粉酶,促使淀粉水解,供胚的生长发育所需。在这种系统里,经过赤霉素处理以后,糊粉层细胞的RNA和蛋白质合成的速度增加了一倍,而合成的蛋白质差不多有一半是α—淀粉酶。 探究设计类——探究淀粉酶对淀粉和蔗糖水解的作
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