DP316微量样品基因组DNA提取试剂盒操作-天根生化科技.PDFVIP

（DP316）微量样品基因组 DNA提取试剂盒操作指南 ——少量血液 天根生化科技（北京）有限公司 版本号 实验准备 1. 100 μl以内抗凝全血 2. 无水乙醇 3. 移液器及配套无菌枪头（10 μl，200 μl ，1ml），1.5 ml离心管 4. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机 实验准备-试剂盒准备 使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。 Carrier RNA储存液的配制 第一次使用Carrier RNA时，请将Carrier RNA （310 µg）溶解在310 µl RNase-Free ddH O中，将 2 溶液分装储存于-20，此时该溶液的浓度为1 µg/ μl ；该储存液应避免反复冻融，冻融次数不能超 过3次。 Step 1 本实验以人血为例，样本量100 μl， 当样本不足100 μl时加缓冲液GA补足100 μl ； Step 2 充分颠倒混匀 56放置10 min， 简短离心以去除 其间颠倒混匀数次 管盖内壁的液滴 加热后颜色会变深发 加入10 µl的Proteinase K 溶液和100 µl的缓冲液GB 绿，摇动观察变澄清 无浑浊态 如果最初所取血液样品体积为1-10 µl，请在加入GB时每个样品加入1 µl Carrier RNA储存液，浓度为1 µg/ μl Step 3 加入50 µl乙醇（96-100%），（室温超 过25，乙醇预先置冰上预冷）。 轻轻颠倒混匀样品，室温放置3 min。简 短离心以去除管盖内壁的液滴。 Step 4 将上一步所得溶液加到吸附柱 12,000 rpm (~13,400×g)离心30 sec ， CR2中（吸附柱放入收集管中） 弃废液，将吸附柱CR2放回收集管中。 Step 5 12,000 rpm (~13,400×g)离心30 sec ，弃废液，将吸附 柱CR2放回收集管中。 向吸附柱CR2中加入500 µl 缓冲液GD （使用前请先检查 是否已加入无水乙醇）， Step 6 12,000 rpm (~13,400×g)离心30 sec ，弃废液，将吸 附柱CR2放回收集管中。 向吸附柱CR2中加入600 µl 漂洗液PW （使用前请先检 查是否已加入无水乙醇）， Step 7 重复操作步骤6。 Step 8 吸附柱CR2室温放置2-5 min 12,000 rpm(~13,400×g