白细胞介素6通过抑制自噬促进人脐静脉内皮细胞-第二军医大学学报.PDFVIP

// 第二军医大学学报　　 2018 年3 月第39 卷第3 期　　 http ： Academic Journal of Second Military Medical University, Mar. 2018, Vol. 39, No. 3 ·273 · DOI ：10.16781/j.0258-879x.2018.03.0273 · 论　著 · 白细胞介素6 通过抑制自噬促进人脐静脉内皮细胞凋亡 1 1,2 1 1* 李冠胜 桂海波 杨 姗 陈雪梅 ， ， ， 1. 重庆医科大学附属第一医院急诊科，重庆 400042 2. 重庆市中医院重症医学科，重庆 400011 [摘要] 目的 探讨白细胞介素 6 （IL-6 ）对人脐静脉内皮细胞（HUVECs ）自噬和凋亡的影响，以及自噬与凋 亡的相互作用。 用 5 、10、20 、50 ng/mL IL-6 诱导体外培养的 HUVECs 24 h 。CCK-8 法检测细胞存活率，流 方法 式细胞术检测细胞凋亡变化，单丹磺酰戊二胺（MDC ）染色观察细胞嗜酸性自噬泡情况，透射电镜观察细胞超微结 构的变化，蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白 cleaved caspase-3 和自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链 3 （LC3 ）、p62 的 表达水平。采用 IL-6 分别联合自噬抑制剂 3- 甲基腺嘌呤（3-MA ）或自噬诱导剂西罗莫司（SRL ）处理 HUVECs ， 观察细胞增殖、凋亡情况及相关蛋白的表达变化。结果 与对照组相比，IL-6 浓度依赖性降低 HUVECs 的存活 P P 率和 LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ比值（ ＜0.05 ），增加细胞凋亡和 cleaved caspase-3 、p62 的表达（ ＜0.05 ），细胞内自噬 P 泡减少（ ＜0.05 ），且自噬小体明显减少。与 IL-6 刺激组相比，IL-6 联合应用 3-MA 诱导 HUVECs 可进一步抑制 P P HUVECs 的自噬水平，细胞内自噬泡和自噬小体数目减少（ ＜0.05 ），LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ比值降低（ ＜0.05 ），p62 表 P P 达增加（ ＜0.05 ），细胞 cleaved caspase-3 表达和凋亡增加（ ＜0.05 ）。与 IL-6 刺激组相比，IL-6 联合应用 SRL P 处理 HUVECs 可以抑制 IL-6 诱导的细胞自噬水平下降，细胞内自噬泡和自噬小体数目增多（ ＜0.05 ），细胞内