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第九章 酶促反应动力学 习题 1.当一酶促反应进行的速率为Vmax的80%时，在Km和[S]之间有何关系？[Km=0.25[S]] 解：根据米氏方程：V=Vmax[S]/(Km [S])得： 0.8Vmax=Vmax[S]/(Km [S]) Km=0.25[S] 2.过氧化氢酶的Km值为2.5×10-2 mol/L，当底物过氧化氢浓度为100mol/L时，求在此浓度下，过氧化氢酶被底物所饱和的百分数。[80%] 解：fES=[S]/（Km [S]）=100×10-3/(2.5×10-2 100×10-3)=80% 3.由酶反应S→P测得如下数据： [S]/molL-1 V/nmolL-1min-1 6.25×10-6 15.0 7.50×10-5 56.25 1.00×10-4 60.0 1.00×10-3 74.9 1.00×10-2 75.0 （1） 计算Km及Vmax。[Km：2.5×10-5，Vmax：75 nmolL-1min-1] （2） 当[S]= 5×10-5 mol/L时，酶催化反应的速率是多少？[50.0 nmolL-1min-1] （3） 若[S]= 5×10-5 mol/L时，酶的浓度增加一倍，此时V是多少？[100 nmolL-1min-1] （4） 表中的V是根据保温10min产物生成量计算出来的，证明V是真正的初速率。 解：（1）由米氏方程得： 15=Vmax?6.25×10-6/ (Km 6.25×10-6)……① 60=Vmax?10-4/（Km 10-4）……② 由①、②得：Km=2.5×10-5，Vmax=75 nmolL-1min-1 （2）V=75×5×10-5/（2.5×10-5 5×10-5）=50.0 nmolL-1min-1 （3）50×2=100 nmolL-1min-1 （4）带如米氏方程可验证。 5.某酶的Km为4.7×10-5 molL-1，Vmax为22μmolL-1 min-1，底物浓度为2×10-4 molL-1。试计算：（1）竞争性抑制剂，（2）非竞争性抑制剂，（3）反竞争性抑制剂的浓度均为5×10-4 molL-1时的酶催化反映速率？这3中情况的Ki值都是3×10-4 molL-1，（4）上述3种情况下，抑制百分数是多少？[（1）13.54μmolL-1 min-1，24%；（2）6.68μmolL-1 min-1，62.5%；（3）7.57μmolL-1 min-1，57.5%] 解：（1）竞争性抑制剂的米氏方程为：V=Vmax[S]/(Km(1 [I]/Ki) [S]) 代入数据得：V=13.54μmolL-1 min-1 i%=（1-a）×100%=（1-Vi/Vo）×100%=24% （2）非竞争性抑制剂的米氏方程为：V=Vmax[S]/((Km [S])(1 [I]/Ki)) 代入数据得：V=6.68μmolL-1 min-1 i%=（1-a）×100%=（1-Vi/Vo）×100%=62.5% （3）反竞争性抑制剂的米氏方程：V=Vmax[S]/(Km [S](1 [I]/Ki)) 代入数据得：V=7.57μmolL-1 min-1 i%=（1-a）×100%=（1-Vi/Vo）×100%=57.5% 6．今制得酶浓度相同、底物浓度不同的几个反应混合液，并测得反应初速率，数据见下表。请利用“Eadie-Hofstee”方程式，用图解法求出Km值及Vmax值。这种作图法与Lineweaver-Burk作图法比较有何优点？[Vmax=160μmolL-1 min-1,Km=8.0×10-5 molL-1] [S]/molL-1 V/μmolL-1min-1 4.0×10-4 130 2.0×10-4 110 1.0×10-4 89 5.0×10-5 62 4.0×10-5 53 2.5×10-5 38 2.0×10-5 32 解：将米氏方程改写成：V=Vmax-Km?V/[S],以V-V/[S]作图，得一直线，其纵截距为Vmax，斜率为-Km，由图得Vmax=160μmolL-1min-1,Km=8.0×10-5 molL-1 优点：实验点相对集中于直线上，Km和Vmax测定值较准确。 7.对一个遵从米氏方程的酶来说，当底物浓度[S]=Km，竞争抑制剂浓度[I]=Ki时，反应的初速率是多少？[V=1/3Vmax] 解：根据米氏方程可得：V=Vmax[S]/ (Km(1 [I]/Ki) [S]),其中[S]=Km，[I]=Ki V= VmaxKm/ (Km(1 Ki/Ki) Km)=1/3 Vmax 8.用下列表中数据确定此酶促反应：（1）无抑制剂和有抑制剂的Vmax和Km值。[无抑制剂时Km=1.1×10-5 molL-1，Vmax=50μ