医药基础-心力衰竭衰竭的实验研究-93页.pptxVIP

心力衰竭的实验研究;心力衰竭时整体、器官、细胞和分 子水平的改变及其病理生理学意义;一、传统心力衰竭动物模型;（Conventional Animal Models of Heart Failure）;心 肌 受 损 ( Impaired myocardium ) ;Classification;（一）冠状动脉结扎模型;大鼠、狗、家兔; 心肌缺血缺氧; ;（二）压力超负荷模型 (Pressure Overload Models);主动脉缩窄模型 (Aortic Banding Models);1.主动脉缩窄模型;缩窄主动脉; 左心室射血阻抗↑ ;腹主动脉缩窄：大鼠、家兔 胸主动脉降枝缩窄：豚鼠;2. 高 血 压 模 型; 左心室射血阻抗↑ ;; 狗 ：建立动静脉瘘或破坏二尖瓣 家兔：主动脉瓣穿孔导致主动脉返流 大鼠：腹主动脉与腔静脉间造瘘; 左 心 衰 竭;（四）心动过速起搏模型;狗：起搏心率〉200 次/分 家兔：起搏心率350￣400 次/分; 心 力 衰 竭;（五）其他模型; 心 肌 病; 心肌病：阿霉素心肌病 心肌病仓鼠;; 可对心力衰竭发生发展的全过程进行研究，包括代偿期、从肥大到衰竭的过渡期、心肌重构过程以及轻中度心力衰竭。;Limitations;（Gene-modified Animal Models of Heart Failure）;研究心力衰竭的相关基因 研究心力衰竭发生发展的分子机制;（一）基因敲除模型;Cardiac-specific “Knock-out”;1. 肌肉 LIM 蛋白基因敲除小鼠; 肌肉 LIM 蛋白调节肌肉分化，敲除其基因的纯合子将发展为扩张性心肌病，伴心肌肥大、间质细胞增生和纤维化，成年小鼠出现心力衰竭。;（ Myogenic Factor 5 Gene Knockout Mice ）; Myogenic Factor 5参与肌细胞的增殖与修复，敲除其基因的小鼠将发展为扩张性心肌病。;（二）转基因模型;Cardiac-specific Transgenic System;1. G蛋白转基因小鼠;(1) Gs а转基因小鼠;过表达Gsа;心脏过表达Gsα的小鼠 基因转录：心脏GsαmRNA增加38倍; 左室射血分数 (EF) 正常 β-AR激动剂与受体亲和力增强 AC活性增加 心肌对Iso和NE敏感性增加; 心肌病、心脏扩大、左室EF下降;(2) Gq а转基因小鼠;2 倍表达：无明显变化4 倍表达：心脏重量增加，PKC?的膜转 位增加，胎儿基因表达增加， 心肌收缩力减弱更高表达：动物死于左右室衰竭和肺淤血; 结扎主动脉 过表达Gqα小鼠 失代偿性离心性肥大 对照小鼠 代偿性向心性肥大;导入无活性Gqα  抑制心肌肥大注射Gqα抗体  消除ANP表达;(3) RGS转基因小鼠;G蛋白信号调节蛋白(regulator of G protein signalling, RGS) 心脏表达：RGS3/4作用：激活GTP酶，使Gqα的信号 转导减弱;RGS GqαGTP酶活性 对照动物 左室肥厚和 ANF表达 RGS4转基因小鼠 减轻 ;（ ?-adrenoceptor Kinase or GPCR Kinase 5 Transgenic Mice ）;过表达?-ARK或GPCRK 5;（ IGF-1 or NGF Transgenic Mice）;过表达生长因子;（ Isolated/Cultured Cardiac Myocyte）; 在活细胞或分子水平研究心力衰竭发生、发展规律以及药物作用等。;Advantages;（一）新生大鼠心肌细胞;;Identification of cell types in cultured cells. To characterize cell types in the culture, immunocytochemical staining was performe