利用霍乱毒素 B亚单位展示猪 O型口蹄疫病毒 VP1蛋白主要抗原表位.pdfVIP

江苏农业学报（ＪｉａｎｇｓｕＪ．ｏｆ Ａｇｒ．Ｓｃｉ．），２０１６，３２（３）：６０１～６０７ ｈｔｔｐ：／ ／ ｗｗｗ．ｊｓｎｙｘｂ．ｃｏｍ ６０１ 李图帅，陈　 瑾，乔绪稳，等． 利用霍乱毒素Ｂ亚单位展示猪Ｏ型口蹄疫病毒ＶＰ１蛋白主要抗原表位［Ｊ］．江苏农业学报，２０１６， ３２（３）：６０１⁃６０７． ｄｏｉ：１０．３９６９／ ｊ．ｉｓｓｎ．１０００⁃４４４０．２０１６．０３．０１８ 利用霍乱毒素 Ｂ 亚单位展示猪 Ｏ 型口蹄疫病毒 ＶＰ１ 蛋白主要抗原表位 １，２ ２ ２ ２ ２ ２ ２ １ 李图帅 ，　 陈　 瑾 ，　 乔绪稳 ，　 汪　 浩 ，　 张元鹏 ，　 侯继波 ，　 郑其升 ，　 胡元亮 （１．南京农业大学动物医学院，江苏 南京 ２１００９５；２． 国家兽用生物制品工程技术研究中心，江苏 南京 ２１００１４） 　 　 摘要：　 为探讨以霍乱毒素Ｂ亚单位为载体制备口蹄疫亚单位疫苗的可行性，利用Ｅ． ｃｏｌｉ表达ＣＴＢ⁃ＧＨｌｏｏｐ 嵌 合基因，用 ＳＤＳ⁃ＰＡＧＥ分析目的基因的表达及表达产物的可溶性，利用神经节苷脂（ＧＭ１）为抗原鉴定重组蛋白五 聚体的形成。 将目的蛋白浓度调整为２００ μｇ／ ｍｌ，以白油佐剂乳化制备疫苗，免疫健康仔猪，免疫后利用ＥＬＩＳＡ测 定特异性抗体水平，评价免疫后体液免疫反应，利用淋巴细胞增殖实验评价细胞免疫水平。 结果表明嵌合基因在 Ｅ． ｃｏｌｉ 中获得高效表达，重组蛋白可溶，并能够形成五聚体；Ｗｅｓｔｅｒｎ⁃ｂｌｏｔ 结果显示重组蛋白能够与口蹄疫病毒 （ＦＭＤＶ）阳性血清发生反应；以每头仔猪２００ μｇ免疫，试验猪产生较高的抗体水平与细胞免疫反应。 关键词：　 重组霍乱毒素Ｂ亚单位； 猪Ｏ型口蹄疫病毒； ＧＨｌｏｏｐ抗原表位； 亚单位疫苗 ＋ 中图分类号：　 Ｓ８５９７９ ７　 　 　 文献标识码：　 Ａ　 　 　 文章编号：　 １０００⁃４４４０（２０１６）０３⁃０６０１⁃０７ Ｃｈｏｌｅｒａ ｔｏｘｉｎ ｓｕｂｕｎｉｔ Ｂ ａｓ ｃａｒｒｉｅｒ ｆｏｒ ｄｉｓｐｌａｙｉｎｇ ＧＨ ｌｏｏｐ ｅｐｉｔｏｐｅ ｏｆ ｔｙｐｅ Ｏ ｆｏｏｔ⁃ａｎｄ⁃ｍｏｕｔｈ ｄｉｓｅａｓｅ ｖｉｒｕｓ ＶＰ１ ｐｒｏｔｅｉｎ １，２ ２ ２ ２ ２ ２ ＬＩ Ｔｕ⁃ｓｈｕａｉ ，　 ＣＨＥＮ Ｊｉｎ ，　 ＱＩＡＯ Ｘｕ⁃ｗｅｎ ，　 ＷＡＮＧ Ｈａｏ ，　 ＺＨＡＮＧ Ｙｕａｎ⁃ｐｅｎｇ ，　 ＨＯＵ Ｊｉ⁃ｂｏ ，　 ２ １ ＺＨＥＮＧ Ｑｉ⁃ｓｈｅｎｇ ，　 ＨＵ Ｙｕａｎ⁃ｌｉａｎｇ （１． Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｎａｎｊｉｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ ２１００９５，Ｃｈｉｎａ；２． ＮａｔｉｏｎａｌＲｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｅｎｇｉ⁃ ｎｅｅｒｉｎｇ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ ２１００１４，Ｃｈｉｎａ） 　 　 Ａｂｓｔｒａｃｔ：　 ＴｈｅｏｂｊｅｃｔｏｆｔｈｉｓｓｔｕｄｙｉｓｔｏｆｉｎｄｏｕｔｗｈｅｔｈｅｒｃｈｏｌｅｒａｔｏｘｉｎｓｕｂｕｎｉｔＢ （ＣＴＢ）ｉｓｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｄｉｓｐｌａｙｉｎｇＧＨ ｌｏｏｐ ｅｐｉｔｏｐｅｏｆｔｙｐｅＯＦＭＤＶ （ｆｏｏｔ⁃ａｎｄ⁃ｍｏｕｔｈｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓ）．ＴｈｅｃｈｉｍｅｒｉｃｇｅｎｅＣＴＢ⁃ＧＨｌｏｏｐｗａｓｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ．ＳＤＳ⁃ＰＡＧＥｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｔｈｅｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙｏｆｔｈｅｒｅｃｏｍｂｉｎ