免疫学检测技术-医学免疫学课件讲述说明.ppt

第十四章 免疫学检测技术;抗原和抗体可以发生高度专一性的结合; 抗原和抗体可以发生高度专一性的结合;抗原和抗体可以发生高度专一性的结合;抗原或抗体检测原理： 借助抗原和抗体在体外特异结合后出现的各种现象，对标本中的抗原或抗体进行定性或定量的检测。 ;抗原或抗体检测原理;;免疫的功能： 1. 抵抗感染（Defense）：机体能抵抗病原微生物侵袭的能力。又称免疫防御。 抗菌、抗病毒、抗真菌、抗寄生虫免疫 2. 自身稳定（Homeostasis）：机体在新陈代谢过程中，产生大量的衰老死亡细胞，免疫的第二个功能就是清除这些细胞，维持机体的生理平衡。 3. 免 疫监视（Immunological surveillance）：机体细胞会因物理、化学和病毒等生物因素的影响，使细胞发生癌变，形成肿瘤等，机体可识别、清除这些细胞，这是免疫系统的第三个功能。当这一功能低下或失调时，会导致肿瘤或癌症。;抗原 （Antigen）;抗原 （Antigen）;抗原如何被识别;;一种细菌可以刺激多少种抗体产生？;一种细菌可以刺激多少种抗体产生？;抗体（Antibody);抗体（Antibody);抗体（Antibody);抗体（Antibody，Ab);抗体（Antibody，Ab);免疫球蛋白的功能;抗体（Antibody) 的产生与功能;抗体产生的主要过程;;;多克隆抗体与单克隆抗体;多克隆抗体与单克隆抗体的制备;单克隆抗体的制备;第一节 免疫学检测技术原理;对抗原或抗体进行定性或定量的检测的原理 ;对抗原或抗体进行定性或定量检测的原理 ;第一节 免疫学检测技术原理;抗原或抗体检测原理;较早的抗原抗体反应检测方法; 一、凝聚反应(Agglutination) 二、沉淀反应 1、溶液中的沉淀反应 2、凝胶扩散沉淀 3、免疫电泳 血清免疫电泳 火箭电泳 对流免疫电泳 三、补体参与的反应 四、免疫标记的抗原抗体技术 酶联免疫吸附（ELISA）;一、凝集反应;一、凝集反应;二、沉淀反应;3、双向扩散：又称琼脂扩散，是利用琼脂凝胶作介质的一种沉淀反应。 琼脂是多孔的网状结构，可使大分子物质通过，分子的扩散作用使分别两处的抗原抗体相遇，比例合适时形成沉淀。可观测到沉淀弧。 沉淀弧的特征与位置取决于抗原分子的大小、结构、扩散系数和浓度等。当抗原、抗体存在多种体系时，会出现多条沉淀弧。;双向扩散法的操作：生理盐水配制1%-5%的琼脂，取4mL倒在普通载玻片上，凝固后打孔，中心孔滴入抗原，外周孔滴入抗体用于测定抗体效价，中心孔滴入抗体，外周孔滴入抗原，用于检测抗原的存在和定性抗原。;二、沉淀反应;4、单向免疫扩散：又称单向琼脂扩散，是定量抗原的一种检测方法。与双向扩散不同的是在琼脂中含有一定量的抗体，孔内加入未知量的相应抗原。在37度保温过程中，孔内的抗原向周围扩散，与抗体形成沉淀圈。根据沉淀圈的大小确定抗原的含量;二、沉淀反应;免疫电泳;;第一节免疫学检测技术原理;第一节 免疫学检测技术原理;第一节 免疫学检测技术原理;第二节 免疫荧光技术在食品检测中的应用;第二节 免疫荧光技术在食品检测中的应用;第二节免疫荧光技术在食品检测中的应用;第二节 免疫荧光技术在食品检测中的应用;第二节 免疫荧光技术在食品检测中的应用;第二节 免疫荧光技术在食品检测中的应用;第二节 免疫荧光技术在食品检测中的应用;第二节 免疫荧光技术在食品检测中的应用; 使用了两种抗体：一抗、二抗 二抗如何获得？;第二节 免疫荧光技术在食品检测中的应用;第三节 免疫酶技术在食品检测中的应用;第三节 免疫酶技术在食品检测中的应用;第三节 免疫酶技术在食品检测中的应用;第三节 免疫酶技术在食品检测中的应用;第三节 免疫酶技术在食品检测中的应用;第三节 免疫酶技术在食品检测中的应用;第三节 免疫酶技术在食品检测中的应用;第三节 免疫酶技术在食品检测中的应用;;; ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂： ①固相的抗原或抗体， ②酶标记的抗原或抗体， ③酶作用的底物。 根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。 （一）双抗体夹心法 　; ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。可设计出各种不同