高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒GD07b株的分离鉴定及Nsp2基因同源性分析.pdfVIP

2010 37 3 # 91 # GD07b N sp 2 1 2 1 1 2 2 , , , , , ( 1. , 510430; 2. , , 510642) :, , RT- PCR Marc-145 , 72~ 96 h CPERT- PCR , PCR ,,N sp 2 , HPPRRSV-G 07b G 07b 19 PRRSV N sp 2 , , N sp 2 CH-1a 4 PRRSV ,60.5%~ 81.6%; 14 ,90. 6%~ 98.9% :;; ;N sp 2 :S858. 28 : A : 1671-7236(2010)03-0091-03 2007 5 L2000K T aKaRa ; NA ( highly pathogenic porcine repro- ( ductive and respiratory syndrome, HPPRRS) , : UPENERGY, : NP3042-60) ; , , EPC Genview ; RNA , , , , , Bio-zol ; Tris- , ,, , ( 120 mL, 880 , mL, 4 g, 13 g) ( porcine reproductive ) and respiratory syndromevirus, PRRSV) 1. 2 方法 N sp 2 1. 2. 1 疑似病料处理与RT-PCR 检测 HPPRRS , 1 ,3 1. 1 材料 HPPRRS , PRRS HPPRRSV HPPRRSV , EP - 80 e (Marc-145) Primer 5.0 PRRSV N sp 2 , : RNAiso plusEx T aq NA 2. 5 mmol/ L P1: 5c-GCGACAAT GTCCCTAACG-3c; dNT PAMV RNA ( ribonucle- P2:5c-CT GGTA(G) CGT CAGCGTT GTT-3c, ase inhibitor) 10. 0 mmol/ L dNTPNA Marker T aKaRa 2751~ 3040 bp, , : 2009-09-21 : 200 bp, : ( 1967- ) , , , , , 290 bp : RNA PCR : ( 1968- ) , , , , , , PCR :94 e 5 min;94 e E-mail: dhe@ scau. edu. cn; Tel: 020 40 s,60 e 30 s, 72 e 40 s,30 ; : ( 20074)