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07年实验生物学的试题，供参考： 张惠展 根据给出的一段需要表达的肽段的序列，设计载体，宿主，限制性内切酶的选择，写出关键的注意点。 2.钟扬 现在获得一个基因，试用生物信息学的知识对其功能，结构，来源等方面进行研究。 ——BLAST同源比对，同源率30%可进行同源模建，或作功能预测，并选定相应基因家族做同源分析，建立进化树或聚类 3.丁建平 举例说明几种结晶蛋白质的方法 4.孙兵 说明从杂交瘤中，分离单克隆细胞的方法。 5廖侃 试设计实验，分析两种蛋白质之间是否存在相互作用。 2008《实验生物学》期中考试试题 请从下列试题中选择5道题进行回答。并写上主讲教师的名字 钟扬——分子进化与生物信息学 费俭——模式生物技术 张惠展——DNA重组技术 廖侃——蛋白质相互作用研究 周兆才——结构生物学 肖华胜——生物芯片 胡苹——基因表达分析 多答无效。 钟扬 从某个新近测序的基因组中发现了一个候选基因，需要进一步预测其功能并鉴定其是否为某个基因家族的成员。试用框图给出相关的生物信息学方法及步骤。 王纲 在荧光定量PCR实验中，如何才能做到绝对定量？ 对于绝对定量的real timePCR，有必要设内参吗？ 无必要——区分相对定量PCR（传统qPCR）与real-time PCR，前者通过扩增后与内标进行比较来相对定量，而real-time则通过在扩增中实时测定荧光量与扩增次数的比率来分析定量。 简述几种实验方法来确定一个作为内参的基因不会因为你的实验条件所改变。 廖侃 蛋白质A是细胞内的一个信号分子，可以结合酪氨酸磷酸化蛋白质，它有三个结构域：一个结合酪氨酸磷酸化蛋白质结构域、一个磷酸化位点结构域和一个结合蛋白质B的结构域，并且能独立表达出有功能的结构域。蛋白质A本身可以被受体酪氨酸激酶磷酸化，磷酸化的蛋白质A与蛋白质B的结合能力下降。蛋白质B也能被酪氨酸磷酸化，但其只有在A存在时才磷酸化，而A本身在任何时候都不具有激酶活性。磷酸化位点都为已知。根据以上条件提出蛋白质间相互作用以及被磷酸化调控的模型。模型不得自己增加条件，并且必须符合以上所有条件。根据你的模型设计实验并加以证明。 要求：1、不包括蛋白质单分子技术类的方法。2、每一个证明实验必须用两种或两种以上的不同方法加以证明（如分子筛、超离心、SDS电泳为三种不同的测量分子量的方法）。3、模型用示意图表示并附文字说明。 答：从条件可知，在本设计中不必再考虑A磷酸化B的可能，以及B被其他磷酸化的可能，则 流程：上游信号（如RTKs）—p-Y—p-Y+A—p-Y+A+B（定位）—p-Y+A+p-B—调控下游；（负反馈或其他调控）：p-A—p-A x B—不能磷酸化B 细胞实验： （1）刺激产生p-Y—WB检测p-B； 刺激产生p-Y—免疫共沉淀A+p-B（用A的抗体）—分离后WB检测p-B （2）磷酸化A—WB检测p-B的量；封闭A的磷酸化位点再WB检测p-B量 （3）用FRET分别检测未磷酸化的A与B的结合与磷酸化后的A与B的结合。 肖华胜 请简述基因芯片的原理及在系统生物学中的应用，并设计一个用基因芯片研究肿瘤分子分型的实验方案。 罗振革 设计实验分析蛋白 A对蛋白B在细胞内定位的影响。 肖保国 简述流式细胞仪和显微镜检查的区别，双染时荧光素选择的原则，细胞表面染色和胞浆染色的不同之处和具体操作时应该注意的事项。 费检 在进行小鼠基因剔除实验中，常用129小鼠的ES细胞和C57小鼠的囊胚，请说明有什么好处和缺点？ 具有自发突变成瘤的倾向，是基因敲除的理想实验动物，例如129小鼠——因为其基因修复能力差 而C57小鼠不易成瘤——基因组稳定，不易突变干扰 09年考题展望 实验考题 王纲：real-time PCR，涉及原理、实验设计等多问； 费俭：模式生物-几种常见小鼠的特点； 钟扬：好像是关于如何判断一个基因是否是新基因，如何研究，要求写出流程图； 肖华胜：基因芯片原理，应用； 廖侃：蛋白质互作，是一道实验设计题，比较难。 其他想不起来，张惠展没出题。 7选5 近交系： 定义：经连续20代（或以上）的全同胞兄妹交配（或者亲代与子代交配）培育而成，近交系数应大于99%，品系内所有个体都可追溯到起源于第20代或以后代数的一对共同祖先 特点：遗传背景均一，实验结果比较准确，可以避免遗传组成不同或个体差异太大等所引起的误差；近交衰退，生活力弱，对生产环境要求高、产仔少、营养要求高。 远交系（封闭群）： 定义：在一定群体内，以非近亲交配方式育成的动物品系，连续15代不从外部引入新的动物种群 特点：遗传背景具有群体均一性，但个体各异，实验能够反映特定群体遗传背景下的情况；繁殖能力强、环境适应能力高。 杂