新型除草剂高粱素生物合成关键酶ARS的双控表达质粒-农药学学报.PDF

农药学学报 2018, 20(2): 169-177 Chinese Journal of Pesticide Science • 研究论文 • DOI: 10.16801/j.issn.1008-7303.2018.0022 新型除草剂高粱素生物合成关键酶AR S 的双控 表达质粒构建及表达条件优化 1,2 1 1 1 1 包莹玲 , 王 磊, 赵 迪, 郑泽华, 景狄波, 1 1 2 *,1 嘉晓勤, 陆跃乐, 李 忠, 陈小龙 (1. 浙江工业大学 生物工程学院 发酵工程研究所，杭州 310014 ；2. 浙江省桐庐汇丰生物科技有限公司，杭州 311500) 摘 要：利用化感物质开发除草剂是目前新型除草剂发展的一个重要方向。高粱素是高粱中分 泌的一种化感物质，可对多种杂草的生长表现出显著的抑制作用。高粱烷基间苯二酚合酶 (alkylresorcinol synthase ，Sb_ARS) 是高粱素生物合成的关键酶。当以大肠杆菌Escherichia coli 作为宿主进行Sb_AR S 的胞内表达时，细胞破碎是其中最为费时且最昂贵的步骤之一。本 研究通过构建新型双控表达质粒pBM123-ars ，实现了Sb_AR S 在大肠杆菌BL21 (DE3) 中的温 控自裂解异源表达；在此基础上，通过优化诱导表达条件，可获得最高的Sb_AR S 酶活力 (相 对酶活力为160.04% ± 8.12%) 及最高的裂解率 (82.81% ± 3.14%) 。研究结果可为新型除草剂高 粱素的生物合成奠定理论基础。 关键词: 除草剂；高粱素；化感物质；生物合成；烷基间苯二酚合酶；双控质粒；大肠杆菌 中图分类号：S482.4；Q786 文献标志码：A 文章编号：1008-7303(2018)02-0169-09 Dual control plasmid construction and expression optimization of Sorghum bicolor ARS for a novel sorgoleone herbicide biosynthesis 1,2 1 1 1 1 BAO Yingling , WANG Lei , ZHAO Di , ZHENG Zehua , JING Dibo , 1 1 2