寡营养条件下典型超微细菌修复PAEs污染水体及分子机理的研究-环境工程专业论文.docxVIP

摘要摘要 摘要 摘要 本项目集中围绕寡营养条件下超微细菌Rhodoferax ferrireducens PAE．UM 对PAEs污染水体的修复能力及其机理开展研究。在松花江底泥中提取的寡营 养超微细菌Rhodoferax ferrireducens PAE．UM菌株基础上，力求通过该代表性 超微菌株对PAEs的降解能力、降解途径及其分子机理的研究，阐明这类细菌 在修复、治理PAEs污染水体的作用及其机理。 菌种的筛选采用的培养基为：巴氏消毒然后过0．221-Lm滤膜的依云水作为 基质，然后加入o．1．1mg／L的邻苯二甲酸酯类污染物作为培养基液；培养温度 为30C，摇床转速为150 r／min；菌种的纯化采用的是极度稀释法；邻苯二甲酸 酯类降解状况采用高效液相色谱法检测，流动相采用乙腈和水；细菌的生长状 况用流式细胞仪进行检测，其中染色剂用SYBY green；菌种的鉴定结果采用 16s RNA测序并通过BLAST获得。 目前课题组已经通过16s RNA测序确定了提取菌种的菌属为红育菌属并命 名为Rhodoferaxferrireducens PAE．UM菌株，相关报道表明该菌属为产电微生 物，可以在利用碳源的同时产生电。这是在国际上首次关于红育菌属降解邻苯 二甲酸酯类的报道。 通过该菌株在不同培养基的生长实验确定了该菌株不能用传统的平板法培 养，而且在传统的LB培养基和无机盐培养基(MSM)条件下也不生长，由此 确定该菌属为专性寡营养细菌，这也是首次关于寡营养条件下超微细菌降解邻 苯二甲酸酯类实验的报道。 通过分析了该菌株在分批培养条件下对各种邻苯二甲酸酯类的降解能力， 混合菌株比纯菌的降解速率要快的多，可以在190小时内将1．Omg／L的邻苯二 甲酸酯类完全降解。而纯菌Rhodoferax ferrireducens PAE．UM可以在285小时 以内降解完初始浓度为O．1mg／L的邻苯二甲酸酯，降解速率各种邻苯二甲酸酯类 之间略有差异。 在污染物降解生长曲线的测定过程中，由于污染物的溶解度非常小，污染 物在水溶液重分布不均，造成了检测过程中的数据波动，后期加入一定的乙腈 助溶剂有利于缓解这种波动。 摘要另外分子机理的探究还在初始阶段，实验已经从现有文献中选取了五种弓 摘要 另外分子机理的探究还在初始阶段，实验已经从现有文献中选取了五种弓 物进行邻苯二甲酸酯双加氧酶的扩增， 但是实验需要进一步探索。 关键词：邻苯二甲酸酯，寡营养， 超微细菌，流式细胞仪，邻苯二甲酸酯 双加氧酶 II AbstractAbstract Abstract Abstract This thesis investigated the restoration of the(phthalate esters(PAEs) polluted water and its mechanism using typical ultramicrobacterium Rhodoferax ferrireducens PAE．UM under oligotrophic conditions．Rhodoferax ferriredueens PAE．UM was isolated from sediment of the Songhua River．Its PAEs degradation ability,degradation pathway and molecular mechanism were investigated．We aimed to illustrate the potential application of ultramicrobacteria in environmental remediation． Filtered Evian was used as the isolation medium and different phthalic acid ester(0．1—1 mg／L)was used as sole carbon and energy source．The incubation temperature set at 30。C，shake bed rotating at 150 r／min。Bacterial consortium from Songhua River were enriched using this method and it Can completely degrade 1．0 mg／L PAEs within 1 60 hours．Pure bacterial culture was further isolated using extinction dilution method．In all