miRNA-21阻止黑色素沉积作用会导致人类黑色素瘤-建国科技大学.PDFVIP

miRNA-21阻止黑色素沉積作用會導致人類黑色素瘤 細胞透過EGFR/Akt途徑造成細胞增生 高而仕 建國科技大學美容系暨美容科技研究所 摘要 有許多種的 miRNA(micro RNA)已經被發現是具有促使癌細胞生長的功 能，或者是促使癌前細胞透過附基因調控 (epigenetic switch)的方式不改變細胞的 DNA 組成，亦不產生DNA 突變的情況下，將細胞轉變成癌細胞，其中已經被發 現可以促使癌前細胞轉變成惡化性癌細胞的 miRNA 有：miR-594 、miR-132 、 miR-181b 、miR-210 、miR-187 、 miR-21 、miR-340 。另外，在陽光或是紫外線 照射下，人類皮膚會發生黑色素沉積的反應以保護細胞避免 DNA的斷裂或是傷 害，而這個黑色素沉積的誘發機制上，有許多蛋白或是轉錄因數的表達，也可能 受到 miRNA的調控。利用序列比對演算後，可以發現 miR-21 與黑色素沉積作 用有關，並且在 UV 刺激的早期，就已經介入，並且透過轉譯阻止 αMSH 大量 表達以避免下游黑色素的產生，但是當皮膚受到過度的刺激影響，或是受到刺激 的影響時間過長，促使 miR-21 大量產生或是持續的作用，miR-21可能直接透過 epigenetic switch的方式促使細胞癌化，而非傳統的認知上皮膚癌細胞是透過 UV-light照射打斷 DNA 造成突變所引起的癌變。本研究將採用小鼠黑色素瘤細 胞株 B16F10 、人類黑色素瘤細胞株C32TG 為實驗模組，採用照射UV-light的方 式誘發黑色素沉積發生，並且在此過程中收集pigmentation pathway 上作用的蛋 白或是轉錄因數的表達是受到哪些 miRNA的調控，同時也分析經由序列比對演 算出來的最具危險性的 miR-21 是否會在阻止黑色素產生的過程中，透過 EGFR/Akt蛋白的活化而增加黑色素瘤細胞的增生，並藉此提供皮膚用藥應該避 免增加 miR-21 表達來避免細胞癌化或是使癌細胞增生的治療方針。 關鍵詞： miRNA 、附基因調控、黑色素沉積、紫外線照射 壹、 前言 人體皮膚黝黑的過程主要為黑色素的產生與沉積。黑色素的化學生成主要來 自 DOPA遇到自由基等氧化作用而開始聚合反應而產生。另外最新的研究指出， 哺乳類動物的免疫系統中，由是以人類而言，黑色素細胞並非單純僅產生黑色素 的功能而已，黑色素的產生與否是與免疫系統的反應有關。類鐸受體 (TLRs)原本 是人體免疫的第一道防線的接收器，用來抵抗致病原與產生免疫反應，因此推測 可能黑色素的合成、沉積與觸發免疫系統的鐸受體 (TLRs)下游作用有關 (Jin et al., 2010; Reddy et al., 1995; Ryu et al., 1998; Tsuda et al.,1996) 。 人體黑色素的沉積(pigmentation) 主要是源自皮膚所遭受到的刺激(Quillen et al., 2011) ，例如：紫外線照射(UV-light) 、摩擦(Rubbung) 、發炎(Inflammation) 。 這些刺激可能直接導致 αMSH(Rouzaud and Hearing, 2006) 、FGF2 、EDN1的釋出 或是其他可能的因數，刺激細胞膜上的受體，例如： MSH 、EGF2R 、EDNRB 等 等。進一步，這些受體的下游蛋白緊接著獲得活化的機會，其中M1CR可以直 接影響MIFT的表現， MITF 正是一個黑色素的敏感基因，當獲得刺激而變成活 化態時，可以進入細胞核內，幫助 MC1R ，TYR ，TRP1 ，DCT(Alonso et al., 2008) 等等有關於黑色素產生的基因進行轉譯與轉錄，進一步產生主導黑色素合成與產 生的蛋白，最後導致黑色素在細胞內的累積。 MicroRNA （miRNA, 微 RNA ）(Xia et al., 2011)即為長度為 22nt左右的5’端帶 磷酸基團、 3’端帶羥基的非蛋白編碼的調控小RNA 家族附圖三(