中药指纹图谱的研究与实践.ppt

中药指纹图谱的研究与实践 屠鹏飞 （北京大学中医药现代研究中心，北京100083） 第一部分 概述 一、建立中药指纹图谱质量标准的必要性 质量稳定的原料是生产质量稳定的产品的先决条件。 中药材绝大部分来源于生物，其活性成分大部分为生物体内次生代谢产物，少数为初生代谢产物。 产地、气候、生态环境、栽培或养殖技术、产地加工、炮制方法等对中药材的化学成分影响很大。 大部分中药的有效成分未被阐明或仅部分阐明。 单一指标的定性、定量分析，不能有效地控制中药材或中成药的质量。 确保中药的生物等效性。 二、中药化学指纹图谱的定义与特点 定义：中药化学指纹图谱系指中药材或中成药经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示该中药主要化学成分特性的色谱或光谱的图谱。 特点： （1）通过指纹图谱的特征性，能有效鉴别样品的真伪或产地； （2）通过指纹图谱主要特征峰的面积或比例的制定，能有效控制样品的质量，确保样品质量的相对一致。 三、中药指纹图谱的作用 作为药品的质量标准组成部分 企业产品质量的内控标准 企业药品生产的过程控制 企业产品创优或打假 第二部分 中药材指纹图谱的建立 品种 药用部位 产地 栽培技术 产地加工方法 炮制 供试品的制备方法 测定方法、条件的考察 方法学考察：稳定性、精密度、重现性 对照指纹图谱的建立 中药材指纹图谱的定义： 中药材指纹图谱系指中药材经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示该中药材特性的共有峰的图谱。 如果原药材需经过特殊炮制（如醋制、酒制、炒炭等），则应制定原药材和炮制品指纹图谱的检测标准。 一、指纹图谱的检测标准 内容： 名称、汉语拼音、拉丁名、来源、供试品和参照物的制备、检测方法、指纹图谱及技术参数。 1、名称 中文名、汉语拼音 2、来源 原植、动物：科名、中文名、拉丁学名、药用部位、产地、 采收季节、产地加工、炮制方法等。 矿物药：矿物的类、族、矿石名或岩石名、主要成分、产地、产地加工、炮制方法等。 来源 动、植物药材：应固定品种、药用部位、产地、采收期、产地加工和炮制方法。 矿物药：固定产地和炮制、加工方法。 供试品的取样：保证供试品的代表性和均一性。 3、供试品的制备 应根据中药材中所含化学成分的理化性质和检测方法的需要，选择适宜的方法进行制备。 制备方法必须确保该中药材的主要化学成分在指纹图谱中的体现。 对于注射剂用中药材，可按注射剂制备工艺制备供试品，制定指纹图谱。 4、参照物的制备 制定指纹图谱必须设立参照物。 应根据供试品中所含成分的性质，选择适宜的对照品作为参照物，如果没有适宜的对照品，可选择适宜的内标物作为参照物。 参照物的制备应根据检测方法的需要，选择适宜的方法进行制备。 5、测定方法 ●包括测定方法、仪器、试剂、测定条件等。 ●应根据中药材所含化学成分的理化性质，选择适宜的测定方法，建议优先考虑色谱方法。 ●对于成分复杂的中药材，必要时可以考虑采用多种测定方法，建立多张指纹图谱。 ●以色谱方法制定指纹图谱所采用的色谱柱、薄层板、试剂、测定条件等必须固定；以光谱方法制定指纹图谱，相应条件也必须固定。 6、指纹图谱及技术参数 (1)指纹图谱 ●根据供试品的检测结果，建立指纹图谱。 ●采用HPLC和GC制定指纹图谱，其记录时间根据样品所含成分的情况而定，一般为1小时；采用TLCS制定指纹图谱，必须提供从原点至溶剂前沿的图谱；采用光谱法制定指纹图谱，必须按各种光谱的相应规定提供全谱。 ●化学成分类型复杂的品种，必要时可建立多张指纹图谱。 ●指纹图谱的建立：根据10批次以上供试品的检测结果所给出的相关参数，制定指纹图谱。 (2)共有指纹峰的标定 采用色谱方法制定指纹图谱，必须根据参照物的保留时间，计算指纹峰的相对保留时间。 根据10批次以上供试品的检测结果，标定中药材的共有指纹峰。 色谱法采用相对保留时间标定指纹峰，光谱法采用波长或波数标定指纹峰。 (3)指纹图谱的评价 以指纹图谱相似度评价软件进行评价 以相对保留时间和峰面积比值进行评价 共有指纹峰面积的比值 以对照品作为参照物的指纹图谱，以参照物峰面积作为1，计算各共有指纹峰面积与参照物峰面积的比值； 以内标物作为参照物的指纹图谱，则以共有指纹峰中其中一个峰（要求峰面积相对较大、较稳定的共有峰）的峰面积作为1，计算其他各共有指纹峰面积的比值。 各共有指纹峰面积比值必须相对固定。 峰面积比值的要求： Ai≥20％At: SD≤±20％ 10%At≤ Ai 20%At: SD≤±25% Ai 10％At：峰面积比值不作要求，但必须标定相对保留时间。 未达基线分离的共有峰，应计算该组峰的总峰面积作为峰面积，同时标定该组各峰的相对保留时间。 非共有峰面积