脱氧杂氮胞苷处理肝癌SMMC.doc

PAGE IV PAGE 19 PAGE I 中文摘要 PAGE I 蚌埠医学院 毕 业 论 文 题 目：5-脱氧杂氮胞苷处理肝癌SMMC-7721 对其HLA-C表达的影响 姓 名： 付倩琦 专 业： 生物科学 年 级： 2005级 学 号： 10510910013 指导教师： 吴守伟 蚌埠医学院教务处制 2009年 06 目 录 一、中文摘要、关键词 3 二、英文摘要、关键词 4 三、论文正文 5 前言 5 1.材料与方法 6 2.结果 13 3.讨论 16 4.结论 18 5.致谢 19 6.参考文献 20 5-脱氧杂氮胞苷处理肝癌SMMC-7721对其HLA-C表达的影响 摘 要 目的：通过去甲基化试剂5-脱氧杂氮胞苷（5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-cdR）处理培养的肝癌细胞系SMMC-7721，用分子生物学的手段评价处理前后培养细胞的HLA-C 方法：首先用5-脱氧杂氮胞苷处理培养的肝癌细胞系SMMC-7721，观察对其细胞形态的影响，再用逆转录PCR（RT-PCR）检测5-脱氧杂氮胞苷处理后HLA-C表达的差异。 结果：在细胞水平上,未经过5-脱氧杂氮胞苷处理的细胞生长密度较大，繁殖较快,经过5-脱氧杂氮胞苷处理的细胞生长密度小,并且5-脱氧杂氮胞苷浓度越大细胞生长密度越小.在分子水平上,经过5-脱氧杂氮胞苷处理的细胞进行RT-PCR时,能明显的看到扩增的HLA-C条带,而经过5μM和10μM浓度的5-脱氧杂氮胞苷处理的细胞进行RT-PCR时,扩增的HLA-C条带（片段长度301 bp）粗细和亮度都逐渐增加，即HLA-C的表达依次增加. 结论：采用5-Aza-cdR处理SMMC-7721细胞，可以有效抑制DNA甲基化转移酶（DNA methyltransferase）活性，逆转肿瘤细胞中异常的甲基化效应，提高HLA-C的表达，抑制肿瘤细胞的免疫逃避及抑制肿瘤的生长,并且在选定的合适的浓度范围内，5－脱氧杂氮浓度越大此种效果越明显。此研究寻求肿瘤逃逸免疫杀伤的机制及其肿瘤治疗提供一定的依据。 关键词：肝癌细胞;HLA-C;5－脱氧杂氮胞苷;甲基化 Effects of 5-Aza-2’-deoxycytidine on Expression of HLA-C in SMMC-7721 ABSTRACT Objective: Go through methylation reagent 5-Aza-2’-deoxycytidine treatment of hepatoma cells nucleoside training SMMC-7721 and by means of molecular biology of the cell before training evaluation differences in gene expression HLA– C i Methods: First use 5-Aza-2’-deoxycytidine training SMMC-7721 cells to observe the influence of cells. Then reoccupy retrovirus PCR detection 5 - deoxi