九种李属植物的RAPD亲缘关系分析.PDF

园　艺 　学 　报 　2002 , 29 (3) : 218～223 Acta Horticulturae Sinica 九种李属植物的 RAPD 亲缘关系分析 1 1 2 阮　颖 　周朴华 　刘春林 (1 2 ) 湖南农业大学理学院 , 长沙 410128 ;　 湖南农业大学作物基因工程湖南省重点实验室 , 长沙 410128 摘 　要 : 以李属植物 9 个种的20 个材料为研究对象 , 用 RAPD 技术对其进行亲缘关系分析 。在建立适 合李属植物的 PCRRAPD 反应体系的基础上 , 从 45 个随机引物 ( 10 mer) 中筛选出24 个 , 对所有供试材料 进行扩增 , 共获得 24 张 DNA 指纹图谱 , 326 条 DNA 谱带 , 其中有 311 条为多态带 。建立了基于 RAPD 的李 属植物亲缘关系树形图 , 树形图的聚类结果与经典的李属植物的起源 、分布和分类基本一致 。另外 , 根据 聚类结果 , 作者认为 : 1) 乌苏里李是中国李的一个变种而非一独立的种 ; 2) 杏李是一李杏杂种且与杏有 较近的亲缘关系 ; 3) 从分子水平证明了欧洲李 ( Prunus domestica L . ) 是由樱桃李 ( P. cerasfi era Ehrh . ) 和 黑刺李 ( P. sp inosa L . ) 自然杂交形成的后代 。 关键词 : 李属 ; RAPD ; 亲缘关系分析 中图分类号 : S 662 . 3 　　文献标识码 : A 　　文章编号 : 0513353X (2002) 李是一类具有重要经济价值的果木 , 在全世界都有广泛的栽培 。对于李属植物的亲缘关系研究 , 〔1～4 〕 国内外已有一些文献资料报道 。由于李属植物的异花授粉特性 , 以及长期的引种选择 , 其变异较 大 , 中间类型多 , 种的界限不清楚 , 常出现同名异种或同种异名的现象 。加之以往对李属植物亲缘关 系的确定主要是根据形态标记 、生殖特性及染色体核型来进行 , 结果不尽一致 , 这些都给李属种质资 源的筛选 、鉴定和利用带来了困难 。本研究以李属植物 9 个种的20 个材料为研究对象 , 用 RAPD 技 术对其进行亲缘关系分析 , 旨在构建 20 个材料的聚类分析树状图 , 为李属植物系统学的研究提供分 子水平上的证据 ; 同时为李属植物种质资源的保护和品种鉴定提供理论依据 。 1 材料与方法 1. 1 　试验材料 供试材料为李属植物 9 个种中的20 个材料 , 其中A～K 取自辽宁省果树研究所熊岳国家李杏种质 资源圃 , L～T 材料取自湖南农业大学园艺系果树实验基地 。供试材料的编号 、名称 、来源和核型的 〔5 ,6 〕 信息 见表 1 。随机引物 、dNTP 、Taq 酶和琼脂糖等试剂均购 自Sangon 公司 。 1. 2 　试验方法 基因组 DNA 的提取和质量检测参照文献 〔7 〕的方法 , 并根据李属植物的特征进行了修改 。DNA 的质量和浓度检测在 DU640 核酸蛋白质分析仪上进行 。根据所测得的浓度 , 取样品DNA 在 14 g ·L - 1