- 1、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
课件:柑橘青霉菌基因克隆与同源.ppt
- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 柑橘青霉菌CYP51基因克隆与同源模建分析 指导老师:刘德立教授 申请团队:夏诗慧 白雪杨 吴赞 刘枝兰 2019 - * 报告内容 1、项目组成员介绍 2、立项背景 3、项目方案 4、预期成果 5、小组分工 2019 - * 项目组成员介绍 姓名 年级 专业 夏诗慧 08级 生物技术 白雪杨 08级 生物技术 吴赞 08级 生物技术 刘枝兰 08级 化生交叉实验班 已修课程: 生物化学、分子生物学、细胞生物学、微生物学、遗传学等理论及相应的实验技能课程 2019 - * 科研经历 夏诗慧:2009年第二学期参与祈超老师关于“海洋放线菌s.arenicola基因组文库构建”的开放性实验;2010年第一学期,进入生物化学及分子生物学实验室学习,加入白雪杨同学的科研立项“柑橘绿霉菌多样性分析”项目组 。 白雪杨:2009年第二学期进入生化实验室学习,参与细胞色素P450课题组的研究;2010年第一学期至今,作为项目负责人参与科研立项“柑橘绿霉菌多样性分析”。 吴赞:2009年第二学期参与冯玲玲老师关于拟南芥FBPase与底物相互作用机理的研究;2010年第一学期进入生物化学实验室学习。 刘枝兰: 2009年第二学期参与冯玲玲老师关于拟南芥FBPase与底物相互作用机理的研究;2010年第一学期进入生物化学实验室学习。 2019 - * 柑橘为芸香科柑橘亚科柑橘族柑橘亚族真正柑橘类植物,世界亚热带地区均有生产。柑橘果肉、皮、核、络均可入药,果肉味道甜美、营养丰富,富含VitaminC,膳食纤维及果胶等,可促通便、降血压、治疗胃寒呕吐、气滞食积、消化不良等症。 目前,我国柑橘面积居世界第一位,产量居第三位,但在区域布局、品种结构、良种繁育等方面与西方国家有很大差距。 立项背景 理论知识 2019 - * 图1 柑桔青霉菌(Penicillium italicum Wehmer)为害的果实 图2 柑桔绿霉菌(Penicillium difitatum Sacc)为害的果实 1、柑橘青霉病和绿霉病是柑橘果实运输贮藏期最重要病害。目前,柑橘青霉病害在贮运期间造成的损失一般达10%左右,严重的高达30%以上。 2、柑橘青霉菌和绿霉菌都属于半知菌亚门真菌。目前抗真菌病害主要使用化学杀菌剂(甾醇14?-去甲基化酶抑制剂),主要以羊毛甾醇14?去甲基化酶(CYP51)作为靶标酶 。抑制真菌甾醇14?-去甲基化酶将会阻碍真菌麦角甾醇的合成。麦角甾醇的缺失会损害细胞膜结构和功能,最终导致真菌死亡。 理论知识 2019 - * 柑橘青霉菌 (PiCYP51) 研究抗药性机理、研发新型高效抗真菌药 与化学杀菌剂分子对接,按打分值筛选高效抗菌药 化学杀菌剂 (CYP51抑制剂) 筛选与PiCYP51同源性最高的模板,虚拟构建其晶体结构 研究PiCYP51 (Hotpoint!) 同源模建 真菌抗药性 不断增强! 应用柑橘生产 2019 - * 研究方案 1.查阅柑橘青霉菌cyp51基因克隆和同源模建研究的相关文献,并确定合适的技术路线 2.分步完成下列实验(见技术路线) 3.分析、整理实验数据,撰写论文 2019 - * 培养柑橘青霉菌 提取柑橘青霉菌总RNA 设计引物,扩增CYP51基因 构建pMD-PIcyp51 测序,对PICYP51基因、蛋白进行序列分析 从已解析的CYP51晶体结构中筛选合适的模板 用clustalw软件进行蛋白序列比对 搭建模型并进行优化 对模型进行评价 商品化杀菌剂与模型的分子对接分析 技术路线 同源模建 克隆表达 2019 - * 研究目标 克隆柑橘青霉菌cyp51基因并表达 得到以人类CYP51为模板的同源模型 应用该模型与杀菌剂进行分子对接分析 筛选出高效抗真菌药 应用农业生产 2019 - * 创新特色 1.运用同源模建等生物信息学的方法探索柑橘青霉菌CYP51与杀真菌剂农药的相互作用以及研究抗药性机理 2.拟选用最新解析的人CYP51晶体结构为模板 2019 - * 预期成果 1.克隆表达柑橘青霉菌cyp51基因,得到以人类CYP51为模板的同源模型。 2.应用该模建与杀菌剂进行分子对接分析。 3.发表研究性学术论文一篇。 2019 - * - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -
文档评论(0)