应用温度敏感型培养皿获得尿道下裂尿源性细胞膜片的研究临床研究.PDFVIP

J 2012，VoL33，No．6 中华a,JL，F科寥志2012年6月第3j鲞蔓!朔ChinPediatr鼬rg，June ·临床研究· 应用温度敏感型培养皿获得尿道下裂患儿 尿源性细胞膜片的研究 王雪周君梅张胜利 余玲 顾怡嚣昊静张明庆陈方 【摘要】目的探讨通过NuncUpeell温度敏感型培养皿获得尿道下裂患儿尿源性细胞膜片的 可行性。方法排尿时，对尿道下裂患儿尿源性细胞进行收集和原代培养，传代后计数细胞并绘制生 长曲线。观察细胞形态学特征，RTPCR、细胞免疫荧光染色鉴定尿源性细胞特异mRNA及蛋白表达 情况；将尿道下裂患儿尿源性细胞转移入Thermo公司的NuncUpcell中，根据温度的变化获得该细 胞的细胞膜片。结果镜下观察和生长曲线图显示：尿遭下裂患儿来源的尿源性细胞具有与正常人 的尿源性细胞类似的体外增殖能力，培养至第f+代牛长仍很旺盛，可以达到109个细胞，能够满足组 织工程所需要的细胞数量；2组细胞具有类似的群体倍增时间；RT-PCR和细胞免疫荧光染色显示这 2组尿源性细胞均表达尿道七皮细胞和平滑肌细胞表面标志物；利用N