广东省客家人群hGSTs基因多态性研究-卫生毒理学专业论文.docxVIP

串山丈学 串山丈学 广东省客家人群hOSTs基阚多卷性研究 GSTZl、GST0已证实具有多态慷。其中，GSTPtl、GSTbll、GSTM3、GSTTl、GSTPI 的基因多态性是当前GSTs酶家族研究焦点所在。GSTs基因多态性与许多癌症有 关，如肺瘸、膀胱癌、乳腺癫、大肠癌等。由于GSTs参与肿瘤化疗药物的体内 代谢，有研究最示GSTs基因多悫性与胖瘤药物化疗疗效有相关性。此步}，GSTs 基因多态豫逐与哮噻、嚣心疼、溺簌蘩撵疆建等溪爨蒺薅及簌数菝麓畜露物覆瑟 致疾病有关。 了解代谢酶基因多态性在人群中的分布规律，可以为疾病与基因多态性相关 研究提供具体的遗传本底资料。近年来国际上不少研究室开展了人群中GSTs基 毽多态蠖分蠢蠛律溪究，结暴淡明不同静族、不煎强族、不强蝗区人耧中GSTs 基因多态瞧分布存在差异。因海也有学者报道了中强托方及中部地区入群GSTs 基因多态性分布，而对南方客家地区人群研究末见报道。本课题是广东省自然科 学基金团队颈目“环境污染物代谢酶基因多态性与人群肺癌和心血管疾痫相关关 系研究”熬分课题之一，为做好该团软课题的蒸勰资辩收集工《乍，因姥，本研 究逶遭对中溺广东省客家遂嚣久器GSTs基嚣多悫戆分蠢蔑律逶行臻究，为遗一 步了解GSTs基因多态性与环蟪因索引起相关疾病的关系研究提供基础资料。 硬究目豹 搽索广东省客家遗区人群谷胱营歉硫转移酶黧戮多态性分布甄襻，笄封环 境相关痰痫的危险因素进行初步分析，为进一步开展环境污染物代谢酶熬因多态 性与环境褶关疾病的研究提供辍础资料。 材糕嚣方法 t．研究人群 选择广东省客家人居住比较多的梅I-I1地区健康秣家人群作为研究人群，用统 一的调查表收集所有研究对敷的楣关资料。 2．DNA抽褥 用经飙的酚一氯仿法抽提外周血DNA。 ／／I 串奎大学 串奎大学 广末害客家A群hOSIs基霹多态鞋骚究 3．GSTs基因聚合酶链及应一限制性片断长度多态性(polymerase chain reaction—restriction fragment length polymorphism，PCR--RFLP)分析 刹用弓l物设计软件Primer Premier 5．0，参考有关文献分别设计GSTAl、 GSTMl、GSTM3、GSTTl、GSTPl薹錾程瘟建点鹣霉|镌，送行PCR扩臻。淤§--Globin 为内对照，双重PCR分别联合扩增GSTTl幕廿GSTMI基因，鉴定鏊因型。常规PCR 扩增GSTAl和GSTPl基因，再分别进行限制性酶切反应，判断基因型。常规PCR 扩增GSTM3基因后，进行12％非变性聚丙烯蹴胺凝胶电泳(polyacrylamide gel ele时ro砖oresis，PAGE)，鉴定基因型。 4，数据处理及统计分析 用SPSSIO．0统计软件对所得实验结果进行统计分析。不同特征群体问的 GSTs蒸因多态性比较用x 2检验，用Logistic回归分析GSTs基因基困型分布与 家族史豹穗关瞧。对GSTPl、GSTM3、GSTAt三耱基嚣多悫经分纛逡行睦遥一瀣{鑫 格(Hardy—Weinberg)平衡吻合度检验。 实验结果 l。骖究人群懿一黢壤凝 研究人群来自广东销梅州地区客家健康膳民，年龄15—80箩，平均年龄38．4 ±13．5岁，无肿瘤、严熏的心血管疾病及慢性疾病、精神异常殿其他重大健康 问题，其祖籍为客家人，定居当地己有三代或三代以上，用调查袭统一收集资料。 本次礤究共收集到谖查对象539辍，其中女髓21l傻，勇往328镶。 2．研究人群GSTs基因多态性分布 本研究检测了GSTs纂因家族的GSTTl、GSTMl、GSTPl、GSTAl、GSTM3五 个鏊因在广东省客家地区人群中基因多态性公布情}兄。检测T 512侧样本盼 GSTTI、GSTMl、GSTPl不潺基因型分毒，GSTTl基毽袋失垄菝攀秘GSTMI基嚣镄 失趔频率分剐为47．5％、62．1％，而GSTPI*A／*A、GSTPI*A／*G、GSTPI*G／*G三 种馨因型的分布频率分别为69．3％、28．1％、2．6％。检测了482例样本的GSTM3 基因多态性，GSTM3*A／*A、GSTM3幸A／术B、GSTM3*B／