课件：铜绿假单胞菌的分类鉴定.ppt

概述 铜绿假单胞菌惯称绿脓杆菌，为革兰氏阴性杆菌，属假单胞菌属。它在自然界分布甚广，空气、水、土壤中均有存在，在潮湿处可长期生存，对外环境的抵抗力比其他菌强，抗干燥的能力也强。 2019 - * 生物学特性 形态：革兰氏阴性杆菌，菌体长短不一 ；单端单鞭毛；动力阳性；无芽胞。 特性：专性需氧；生长温度范围是25℃~42℃， 最适生长温度35℃，4℃不生长。 2019 - * 生物学特性 抗原性: O抗原 H抗原 粘液抗原 R抗原 菌毛抗原 产生荧光素和水溶性的绿脓素，培养物呈蓝绿色。 2019 - * 生物学特性 在血平板上形成大而扁平、湿润、有金属光泽、蓝绿色、透明溶血环菌落，有生姜味； 在普通平板、血平板、麦康凯平板上可形成5种不同形态的菌落 典型型 粘液型 侏儒型 粗糙型 大肠菌样型 2019 - * 生物学特性 菌落呈灰绿色，大小 不一,扁平湿润，边缘不规则呈伞状伸展，表面常可见金属光泽。　 典型型（麦康凯平板） 2019 - * 生物学特性 产绿脓素 琼脂染成黄绿色 典型型（普通平板） 2019 - * 生物学特性 菌落光滑凸起 成粘液状 粘液型（血平板） 粘液型（麦康凯平板） 2019 - * 生物学特性 菌落中央凸起 边缘扁平 表面粗糙 粗糙型（麦康凯平板） 2019 - * 生物学特性 菌落圆形凸起 似大肠埃希菌菌落 大肠型（麦康凯平板） 细小，无光泽 半透明菌落 侏儒型（麦康凯平板） 2019 - * 生化特性 氧化酶：+ 葡萄糖的氧化（O/F）：O 枸橼酸盐利用：+ 精氨酸双水解：+ 明胶液化：+ 硝酸盐还原：+ 乙酰胺酶：+ 吲哚试验：- 2019 - * 微生物学检验 2019 - * 脓液 痰 尿液等 直接涂片、革兰染色、镜检 分离培养 （血平板、麦康凯） 18-24h 35℃ 可疑菌落（金属光泽、β-溶血、产绿色素、特殊气味） 初步鉴定 最终鉴定 色素鉴定 生化 反应 42℃ 生长 分型 （血清学 噬菌体） 革兰阴性杆菌，氧化酶阳性 菌落特征 气味 绿脓素 报告 检验程序 药敏试验 2019 - * 试验材料 病料：痰液标本 试剂：氧化酶纸片，明胶、革兰染色液、药敏纸片、无菌生理盐水及生化管配套试剂等 培养基：普通平板、血平板、麦康凯平板、半 固体培养基、非发酵菌微量生化管等 其它 ：显微镜、培养箱、小试管、载玻片、 接种针、接种环、酒精灯、火柴、平皿等 2019 - * 分离培养 标本采集：脓液、浓痰（无菌拭子） 痰液标本的前处理 加入等量的PH 7.6 的1% 胰酶溶液，放置35℃、90 min使痰液均质化。 直接涂片，革兰氏染色，镜检 分别接种普通平板、血平板和麦康凯平板，培养18—24h ，进一步进行鉴定。 2019 - * 初步鉴定 选出可疑菌落 金属光泽、β-溶血、产绿色素、特殊气味等 初步鉴定 染色镜检：取可疑菌落，进行革兰氏染色、镜检。 氧化酶试验：挑取可疑菌落于滤纸片上，滴加一滴新配制的5%二甲基对苯二胺试剂，15-30min内，出现红色至紫红色，为阳性；若不变色，为阴性。 2019 - * 绿脓菌素试验：选取可疑菌落2-3个，置于绿脓菌素测定用培养基，于37℃培养24h，加入氯仿、色素后，再加入盐酸 ，上层稀盐酸液内出现红色为阳性，表示菌落中含有绿脓菌素。 初步鉴定 2019 - * - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 铜绿假单胞菌的分离及鉴定 组员：张冲 郭泽 王平 - 铜绿假单胞菌 2019 - * 实验目的 了解铜绿假单胞菌的微生物学特性 掌握微生物实验技术基本原理及操作 熟悉铜绿假单胞菌的分离鉴定程序及 方法 2019 - * - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -