慢病毒介导的CBS基因过表达对原代皮质神经元β淀粉样蛋白分泌的影响.PDF

第３６卷 第３期 世界科技研究与发展 Ｖｏｌ．３６ Ｎｏ．３ 　 　 ２０１４年６月 ２８６－２９０页 ＷＯＲＬＤＳＣＩＴＥＣＨＲ＆Ｄ Ｊｕｎ．２０１４ ｐｐ．２８６－２９０ 慢病毒介导的ＣＢＳ基因过表达对原代皮质神经元 β淀粉样蛋白分泌的影响 朱丽娟　陈筱山　何选丽　文　明　晏　勇 （重庆医科大学附属第一医院神经内科，重庆４０００１６） 摘　要：目的通过过表达手段上调胱硫醚 合成酶（Ｃｙｓｔａｔｈｉｏｎｉｎｅｓｙｎｔｈａｓｅ，ＣＢＳ）在原代神经元细胞中的表达，观 β β 察其对原代神经元 淀粉样蛋白（Ａ ）分泌的影响。方法 使用过表达ＣＢＳ慢病毒载体感染体外培养的原代皮质 β β 神经元，设定为慢病毒介导阳性（ＣＢＳ）组、另设阴性对照慢病毒感染（ＮＣ）组、未经慢病毒感染（ＣＯＮ）组。采用实 时荧光定量ＰＣＲ检测ＣＢＳ基因ｍＲＮＡ的表达，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测ＣＢＳ蛋白的表达，采用Ｅｌｉｓａ检测Ａ４０的表达水 β 平。结果使用过表达ＣＢＳ的慢病毒载体感染体外培养的神经元，实时荧光定量ＰＣＲ检测其ｍＲＮＡ的表达上调明 显升高，与ＮＣ组和ＣＯＮ组相比差异有统计学意义（Ｐ＜００１），Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ结果显示蛋白表达升高与定量ＰＣＲ一 致，Ｅｌｉｓａ检测感染７２小时后ＣＢＳ组、ＮＣ组、ＣＯＮ组Ａ４０的分泌分别为（１８２１９±２４５２）ｎｇ／Ｌ、（４１１９０±１２４３） β ｎｇ／Ｌ、（３９０４１±５４５３）ｎｇ／Ｌ，ＣＢＳ组与 ＮＣ组和 ＣＯＮ组相比差异有统计学意义（Ｐ＜００５）。结论 慢病毒介导的 ＣＢＳ基因过表达可降低原代皮质神经元Ａ４０的分泌。 β 关键词：皮质神经元；胱硫醚 合成酶；慢病毒；淀粉样蛋白 β β 中图分类号：Ｒ７４１．０５　　　文献标识码：Ａ　　　ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００６－６０５５．２０１４．０３．０１５ ＥｆｆｅｃｔｏｆＯｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＣＢＳＭｅｄｉａｔｅｄｂｙＬｅｎｔｉｖｉｒｕｓ  ｏｎＡ ｉｎＣｏｒｔｉｃａｌＮｅｕｒｏｎｓ β  ＺＨＵＬｉｊｕａｎ　ＣＨＥＮＸｉａｏｓｈａｎ　ＨＥＸｕａｎｌｉ　ＷＥＮＭｉｎｇ　ＹＡＮＹｏｎｇ （ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＮｅｕｒｏｌｏｇｙ，ｔｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＣｈｏｎｇｑｉｎｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ４０００１６） Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓＣｙｓｔａｔｈｉｏｎｉｎｅＳｙｎｔｈａｓｅ（ＣＢＳ）ｇｅｎｅ，ａｎｄｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｉｔｓｅｆｆｅｃｔｏｎＡ ｉｎｃｏｒｔｉｃａｌｎｅｕ β β ｒｏｎｓ．ＭｅｔｈｏｄｓＴｈｅｃｏｒｔｉｃａｌｎｅｕｒｏｎ