第11章 生物素亲合素放大技术讲座.pptxVIP

第十一章 生物素-亲合素放大技术;第二节 亲合素、链霉亲合素的理化性质与标记 　一、理化特性 　二、亲合素（或链酶亲合素）的标记;第三节 生物素-亲合素系统的特点一、灵敏度　二、特异性三、稳定性　四、适用性五、其他;维生素H 动、植物组织中广泛 分布,卵黄和肝含量高 MW 244.31D.;一、活化生物素 ;生物素活化;活化生物素;标记蛋白质醛基的活化生物素;标记蛋白质巯基的活化生物素;标记核酸的活化生物素;生物素脱氧核苷三磷酸（Bio-dUTP） 作为TTP的结构类似物，可采用缺口移 位法掺入到双链DNA中。;活化生物素通过侧链与蛋白分子连接； 一个蛋白分子可被多个生物素标记－多价性； 对BNHS多标记抗体, BHZ则多标记微酸性抗原； 抗原、抗体标记后活性不变； 可对标记材料（如酶）标记：碱性磷酸酶标记后 活性将降低；;选择活化生物素：依抗原或抗体分子所带可标记基团 的种类（氨基、醛基或巯基）以及分子的酸碱性； 控制生物素：蛋白质比例 生物素：IgG 用量比(mg/mg)宜为2:1, IgG应用浓度 0.5~5μg/ml; 生物素1~3个/Ag，3~5个/Ab； 使用交联臂减少空间阻力;第二节 亲合素、链霉亲合素的理化性质与标记; 结构 四亚基糖蛋白 四肽链蛋白 无糖基 PI