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- 2019-04-14 发布于天津
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手足口病柯萨奇病毒和型实时荧光定量检测方法的建立吕莉琨杨东靖李力谭昭麟李佳萌苏旭天津市疾病预防控制中心天津摘要目的建立一种快速灵敏特异的实时荧光定量逆转录聚合酶链反应方法以期用于柯萨奇病毒和型的临床检测中方法根据上述三种病毒基因保守序列设计特异性引物建立并优化方法分别构建三种病毒的部分基因的重组质粒作为病毒的体外转录标准品以倍稀释的标准品为模板评价新方法的灵敏度以倍稀释的标准品为模板批内和批间各重复次实验计算变异系数评价新方法的重复性以其他种肠道病毒及两种呼吸道病毒为模板评价新方法的特异性以临床
手足口病柯萨奇病毒A2、A4和A5型SYBR Green I
实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立*
吕莉琨,杨东靖,李力,谭昭麟,李佳萌,苏旭**
(天津市疾病预防控制中心,天津 300011)
【摘要】目的 建立一种快速、灵敏、特异的SYBR Green I实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(rRT-PCR)方法,以期用于柯萨奇病毒A2、A4和A5型的临床检测中。方法 根据上述三种病毒vp1基因保守序列设计特异性引物,建立并优化SYBR Green I rRT-PCR方法。分别构建三种病毒的vp1部分基因的重组质粒作为病毒的体外转录标准品,以100~109倍稀释的标准品为模板,评价新方法
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