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HIV的检测方法 HIV感染标志 这些标志的测定可为HIV感染及临床疗效的考核提供极为重要的诊断、治疗和预后指征。 病毒标志是指直接从HIV感染者体内分离出病毒或检出HIV组成成分(抗原或核酸) 免疫标志是指HIV感染所产生的HIV抗原、抗体等免疫物质。 相关标志是指HIV感染后与艾滋病病情进展有密切关系的某些标志,如CD4细胞、CD8细胞 病毒标志 免疫标志 相关标志 与诊断技术密切相关的HIV抗原 目前HIV抗体的检测是艾滋病实验室检测中最常用的方法,因为HIV抗体是患者感染HIV后最容易检出并且持续时间最长的免疫学标志,而且抗体的检测方法大多简便、经济,易于推广应用。 HIV检测的最佳时间 最佳时间 高危行为后一般需要2-4周时间就可以检测出艾滋病HIV抗体。高危行为后2周开始可检测出艾滋病抗体,也就是说2周后就适合做艾滋病抗体检测了。时间越往后,检测的准确性就越高;绝大多数被HIV感染的人在4周后就能够产生足够多的抗体。 艾滋病窗口期 艾滋病窗口期内的检测结果都不是最终的结果。目前国内专家认定的窗口期是高危后3个月。 HIV实验室诊断 检测的主要步骤 2 HIV抗体的初筛检测 1 标本收集 4 检验程度分析 3 确证(确认)试验 HIV抗体的初筛检测 酶联免疫吸附实验 从尿液中测抗体 胶体金法检测HIV1/2抗体实验 明胶颗粒凝集试验 4 1 2 3 4种最为常见的HIV抗体初筛检测 酶联免疫吸附实验 方法 原理 都是通过加入特定的酶进行的一种催化显化反映,产生HIV抗原—HIV抗体—酶标记的抗人免疫球蛋白抗体复合物。然后进行光密度值测定,与临界值对比的方法。 1.间接法 2.双抗原夹心法 3.竞争法 酶联免疫吸附实验(ELISA)是最常见的HIV抗体检测方法,它具有准确性高、价格低廉、判断结果有客观标准、结果便于记录和保存等优点,适合于大批量标本的检测,是献血员筛选和临床诊断最常用的方法。 ← 蛋白印迹试验 电泳分离 稀释,反应 加入抗人-IgG酶结合物 可使有反应的抗原、抗体结合条带呈现紫褐色,这表示阳性反应 结论 蛋白印迹试验 初筛试验每一次检测阴性者可报告阴性,若第一次检测阳性,则需进行复测,复测时(需要用不同类型的试剂)可同时测定两孔,判定方法如下: (-) (+) (+) 2.(-)(-) 3.(+)(-)/(+) 阴性 阴性 阳性 第一次检测 第2次检测 结果判定 检验程度分析 新技术的应用PCR 理论上讲PCR扩增DNA产量是呈指数上升的。PCR技术具有特异性强、敏感性高、快速、简便、对起始材料质量要求低等特点。 过程 2. 复制 聚合酶链反应技术(Polymerase Chain Reaction,PCR)又称无细胞分子克隆或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增技术,是近年来发展起来的一种的短时间内大量扩增特定DNA片段的新技术。 1. 提取 PCR用于检测HIV的优点 ian 优点 与传统检测抗体的方法相比,其灵敏度和特异性更高,从而对HIV的定量检测提供了有效的手段 对潜伏状态的HIV的检测不依赖于HIV在宿主细胞的生长活性。 1 2 3 不依赖于宿主的免疫反应,无须等到免疫系统对HIV产生抗体后才能检定宿主受HIV感染的状态,这有利于对血清阳转以前标本的检测和对阳性母亲所生婴儿的HIV感染的调查 Thank You! * * Content Layouts
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