微量蛋白胶回收试剂盒-天恩泽.PDF

蛋 CAT#:90402-50 常温运输和保存 白 质 系 列 微量蛋白胶回收试剂盒 Mini Protein Gel Extraction Kit 使用手册V1. 1 北京天恩泽基因科技有限公司 北京市海淀区上地信息路26 号北京市留学人员海淀创业园中关村创业大厦506 网址： ；电话：400-6765278 ；电邮：order@ 产品及特点 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS）不仅可用于检测蛋 白质的相对分子质量，而且也是分离纯化蛋白质的重要工具之一，随着蛋白 质技术的微量化，有必要从凝胶中回收蛋白质以用于制备抗体、免疫印迹、 氨基酸组分分析或末端序列测定等。本产品就是专门为此用途开发的微量蛋 白胶回收法，它具有下列特点： 1. 简单，不需要复杂而昂贵的仪器（如电洗脱仪）。 2. 适用于变性胶（SDS）和非变性胶。 3. 回收率一般在50-90%之间（跟蛋白质大小，洗脱时间相关）。 4. 跟后续的实验兼容，包括2-D 电泳、质谱测序等。 规格及成分 成 份 编 号 小扁盒包装 溶液A 90402A 10 mL 溶液B 90402B 50 mL 专用研磨杵 80603 50 只 使用手册 90402sc 1 份 运输及保存 常温运输和保存，有效期一年。 自备试剂 无 使用方法 1. 按常规方法进行变性（SDS）或非变性蛋白电泳。 2. 切取含目的蛋白的胶 （尽可能地把多余的胶切除，否则会影响回收效率）。 注意：固定和染色后蛋白回收效果很差，所以建议把样品分多孔上样，电 泳后只切其中一个样孔的胶条进行固定和染色，然后将此胶条放回到在整 体胶中原来的位置，通过显色胶条上的蛋白条带找到在未染色胶上对应区 域，并切下此区域的胶进行回收。 3. 将切下的胶块转移到 1.5 mL 塑料离心管中。 4. 用研磨杵充分将胶块压磨成尽可能细小的碎片。 5. 加入200 uL 溶液A ，4℃摇晃洗脱至少2- 16 小时（过夜）。此时最好将 溶液B 放在冰箱预冷。 6. 10,000 g 离心 10 分钟，转移上清到新的离心管中，注意不要吸取碎胶。 7. 加入5 倍体积的预冷的溶液B，摇晃混匀。 8. -20℃放置至少10-30 分钟。 9. 室温 12,000 g 离心5-20 分钟，弃上清。 10.室温充分晾干，得到的沉淀即为回收的蛋白质。回收的蛋白质可溶解在适 当的缓冲液中，可用于后续实验 （2-D 电泳、质谱测序等）。