组培第四节学科知识.pptVIP

培养条件;　概 述;　　温度是植物组织培养中成功的 重要条件。 为保持一定的温度，一般在密 闭保温较好的培养室中进行，由空 调机或调温调湿机等来调节室温。 ;　　植物组织培养在最适宜的温度下生长分化才能表现良好，大多数 植物组织培养都是在25±2oC之间进行： 1.一般控制在25±2oC。低于15℃时培养，植物组织会表现生长停止， 高于35℃时对植物生长不利。 2.植株种类及外植体的不同，其最适温度也是不同的。如百合20℃； 月季25－27℃；番茄28℃；菊芋30℃。 　 在植物组织培养中大多采用最适温度，并保持恒温培养，以加速 生长。 ;不同培养目标采用的培养温度也不同。实例：百合鳞片在30℃以下再生的小鳞茎的发叶速度和百分率比在25 ℃以下的高。桃胚在2～5℃条件进行一定时间的低温处理，有利于提高胚培养成活率。用35℃处理草莓的茎尖分生组织3～5d，可得到无病毒苗。 温度不仅影响植物组织培养苗的生长速度，也影响其分化增殖以及器官建成等发育进程。 实例：烟草芽的形成以18℃为最好，在12℃以下，33℃以上形成率皆最低。菊芋块茎组织在15℃以下发根受到很大影响。;温度对植物生长的影响; 温度预处理的影响;2.湿 度; 3.光 照;　　光照强度对培养细胞的增殖和器官的分化有重要影响． 　　从目前的研究情况看，主要表现在以下几个方面： ★ 影响外植体细胞的增殖、组织和器官的分化。 ★ 有的材料愈伤组织的诱导需光或需暗； ★ 光照强，幼苗生长健壮； ★ 光照弱，幼苗生长弱小，容易徒长。 ★ 有的材料适合光培养，有的则适合暗培养。 举例如下：① 地钱叶绿素含量高的愈伤组织只有在光照条件下才能很好 增殖。②在卡里佐枳橙茎尖的生长中也同样，随着光照强度的增加，分 化产生的新梢数也随着增加。;3.2 光质（light wave);3.3 光周期（light period);日照长度; 光照的主要作用小结;4.渗透压;1～2个大气压对生长有促进作用 ； 2个大气压对生长有阻害作用； 5～6个大气压生长就会完全停止； 6个大气压细胞就不能生存； 4个大气压时有50%的生长受阻； 但一回复到正常的培养基又能很好的生长。 ; 不同的植物对培养基最适pH值的要求也是不同的，大多在5-6.5左右，一般培养基皆要求5.8，这基本能适应大多数植物培养的需要。 　 pH值大小调节可用0.1N的NaOH和0.1N的HCl来调整。调节时一定要充分搅拌均匀。;　 pH值适度因材料而异，也因培养基的组成而不同。以硝态氮作 氮源和以铵态氮作氮源就不一样，后者较高些。 一般来说pH值高于6.5时，培养基会变硬；低于5时，琼脂不能 很好地凝固。因为高温灭菌会降低pH值（约0.2-0.3个pH值），因此 在配制时常提高pH值0.2-0.3单位。; 不同植物的最适pH值举例; 举例：番茄根的培养用Fe2(SO4)3和FeCl2，pH值超过5.2时生长就 很差。这是因为pH值为中性时铁成为不溶性的氧化物沉淀，造成铁的不 足而引起的。而若采用螯合铁，铁成为有机盐，则pH值到7.2也不会产生 缺铁现象。 ; pH值的变化及缓冲液的使用;6. 气体（gas）;氧的影响; 小缨萝卜根的培养在乙烯0.04mg/L时对侧根的形成起阻碍作用，1mg/L时对分裂有影响，0.1%阻碍伸长。二氧化碳则1%浓度时阻害生长。 ; 进行液体培养时，为解决通气问题要考虑振荡的次数、容器的类型、振幅、培养基量、培养基的种类等。;课后作业题