课件：白假丝酵母菌.pptVIP

3．微生物检验 1.标本采集：所致疾病不同，取不同标本。2.检验程序P3543.检验方法及鉴定 1）直接显微镜检查：取脓汁、痰和局部炎症性分泌物直接涂片，有些标本需用KOH先消化，革兰染色后镜检，显微镜见到革兰阳性(着色不均匀)、圆形或卵圆形菌体或孢子及假菌丝，厚膜孢子较少见。 * 真菌 * 2）培养检查：将标本接种在沙氏培养基上，25℃或37℃培养1～2d后，可出现奶油色类酵母型菌落。镜检可见假菌丝和芽生孢子。 * 真菌 * 3)鉴定试验 芽管形成试验：将假丝酵母菌接种于0.2～0.5ml血清中，37℃孵育1.5～４h观察有无芽管形成。白假丝酵母菌可形成芽管，其他假丝酵母菌不形成芽管。 * 真菌 * 芽管 芽管 芽管 厚膜孢子形成试验： 将假丝酵母菌接种于玉米粉培养基25℃孵育1-2d 后，白假丝酵母菌在菌丝顶端、侧缘或中间形成厚 膜孢子。 * 真菌 * 厚膜孢子 糖同化和糖发酵试验： 凡发酵某种糖一定能同化该糖，故只需做那些不发 酵糖的同化试验。将假丝酵母菌接种糖发酵管，25℃孵 育，一般观察2～3d，对不发酵或弱发酵管可延长至10d 或2—4周。观察有无酵母生长或液体培养基是否变混 浊。现在商品化的产色培养基可快速鉴定白假丝酵母菌 和其他假丝酵母菌。 * 真菌 * TZC试验： 将白色念珠菌接种于含0.005％氯化三本四氮唑的沙保 培养基中，经22～25℃，24～48h培养，白色念珠菌不 变色或仅淡红色，其他念珠菌或酵母菌呈红色或深红 色(被还原为红色的三苯甲) 。 血清学试验：取病人血清作ELISA、免疫印迹法等检测白假丝酵母菌抗原。 核酸检测：用PCR法将白假丝酵母菌DNA分子扩增后以分子探针检测，具有较好的敏性和特异性。 动物试验 ： * 真菌 * 新型隐球菌 新型隐球菌又名溶组织酵母菌，是土壤，鸽类，牛乳、水果等的腐生菌，也可存在人口腔中。 可侵犯人和动物，一般为外源性感染，但也可能为内源性感染，对人类而言，它通常是条件致病菌。 * 真菌 * 较大球形，直径可达5～20um， 有肥厚的荚膜，折光性强，一般染料不易着色，难以发现，称隐球菌， 用墨汁阴性显影法镜检 ，可见到透明荚膜包裹着菌细胞， 菌细胞常有出芽，但不生 成假菌丝。 * 真菌 * 生物学特性 在沙保氏琼脂及血琼脂培养基上，于25及37℃皆可生长，而非病原性隐球菌在37℃不能繁殖。 酵母型菌落，呈白色。 本菌能分解尿素，以 此与酵母菌和念珠菌鉴别。 * 真菌 * 致病性 本菌大多由呼吸道转入，在肺部引起轻度炎症，或隐性传染。 侵犯中枢神经系统，发生脑膜炎、脑炎、脑肉芽肿等。 此外可侵入骨骼、肌肉、淋巴结、皮肤粘膜引起慢性炎症和脓肿。 * 真菌 * 微生物学检验 1．直接镜检：常用墨汁涂片法。 2．分离培养： 在沙保培养基上，室温、37℃2～3天即可长出典型 酵母型菌落。有荚膜者菌落粘稠。 * 真菌 * 3．糖同化及发酵试验：本菌不发酵各种糖类，但能同化葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、半乳糖、肌醇，不同化乳糖。 4．酚氧化酶试验：在含Ｌ－多巴橘橼酸铁和咖啡酸培养基中，经２～５天培养，新型隐球菌出现棕黑色菌落。 ５．尿素酶试验：新型隐球菌产生尿素酶，在尿素培养基（含尿素及酚红指示剂）中分解尿素形成氨和CO2，以致培养基的pH值升高，使酚红由黄变为粉红色为阳性，而白色念珠菌为阴性。 * 真菌 * 谢　谢 * 真菌 * 临床标本 直接检查 分离培养 其它方法 核酸 直接 25℃ 35℃ 检测 检测 动物 检测 镜检 抗原 抗体 试验 菌落观察 固定标 墨汁 KOH法 本染色 染色 镜检 小培养 生化 荧 革 P 亚 反应 光 兰 A 甲 S 基 蓝