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抗人球蛋白交叉配血操作规程
[样本要求]:血样用枸橼酸钠或EDTA等抗凝,用血清代替血浆进行检测时,用前离心,2000g×10min,防止纤维蛋白干扰反应结果。
[样本准备]:将供者红细胞和受者红细胞各配制为1%生理盐水悬液。
将受血者与献血者的红细胞血清分离;
[配套试剂]:抗人球蛋白交叉配血检测卡,低离子介质溶液
[实验步骤]:
(1) 试剂卡室温平衡,离心一次,标记编号;
(2) 将配血的标本1 500 g离心5分钟;
(3) 主侧加入用低离子液稀释至1%的供者红细胞50 UL,受血者血浆(或血清)50 UL;次侧加入用低离子液稀释至1%的受血者的红细胞50 UL,供者血浆(或血清)50 UL ;
(4)将配血卡置37 ℃专用孵育器孵育15分钟
(5)使用专用离心机离心5分钟(900r/min2分钟、1500r/min,3分钟),判定结果。
[结果判定]:
一.阳性(+ ):红细胞浮在凝胶表面或部分散入于胶中(结果大于等于1+),表示配血不成功,需进一步检测。
双相(d.p)既有阳性结果,同时也有阴性结果。
溶血(Hemo):红细胞溶解,作为阳性结果对待。
二.阴性(-):红细胞沉于微柱凝胶的尖底部,表示配血成功。
备注:1.非特异性凝集:在配血过程中还会出现一些非特异性凝集的现象。当血液标本中含有较多纤维蛋白原时,配血会出现阳性的结果,可用以下办法去除血清中的纤维蛋白:(1)轻轻摇动试管,弃去纤维蛋白网;(2)把血标本置37 ℃中水浴,待血清自动析出或水浴后离心,将纤维蛋白弃去。如果患者的血液中含有较高的冷凝集素,在春、秋、冬三季用凝聚胺配血会出现凝集的现象,但凝集在37 ℃水浴中会解离。这种患者配血是可将红细胞用37 ℃的生理盐水洗涤红细胞3次,再在37 ℃
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