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- 2019-04-15 发布于中国
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血红蛋白的提取和分离 一、基础知识 (一)凝胶色谱法:(也叫分配色谱法) 根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。 原理:所用凝胶实际上是一些微小的多孔球体,大多数是由多糖类化合物构成的。在小球体内部有许多通道,当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时,相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程较长,移动速度较慢;而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快。相对分子质量不同的蛋白质因此得以分离。 凝胶色谱法分离蛋白质的原理 (二)缓冲溶液 具有缓冲作用的溶液称缓冲溶液。缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液PH的影响,维持PH基本不变。一般由缓冲物质对构成,如: H2CO3 / NaHCO3 、NaH2PO4 / NaHPO4 作用机制:以H2CO3 / NaHCO3 为例 A:当酸性物质(如乳酸)进入后,与溶液中的 NaHCO3 发生作用,生成乳酸钠和碳酸,而碳酸可以分解成CO2和H2O,CO2排出则PH不变; B:当碱性物质(如碳酸钠)进入后,与溶液中的H2CO3 发生作用,形成 NaHCO3 ,溶液PH不变。 (三)电泳 1、定义:是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。 2、原理:许多大分子都具有可解离的基团,在一定的PH下,这些基团会带上正电或负电;在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动
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