2免疫磁珠在ELISA中的应用及方案设计.pptVIP

1.3 免疫磁珠技术 免疫磁珠（IMB）技术：是一种以特异的抗原抗体反应为基础的免疫学检测和分离技术。它是以抗体包被的磁珠为载体，通过抗体与反应介质中特异性抗原结合，形成抗原-抗体复合物，此复合物在外加磁场的作用下发生定向移动，从而达到分离抗原的目的。 基本原理：磁性微球经过一定处理后，可将抗体结合到磁珠上，形成免疫磁性微球，免疫磁性微球的抗体与特异性抗原结合形成抗原-微球复合物，该复合物在磁场中具有与其它组分不同的磁响应性，在磁力作用下，该复合物发生力学移动，从而达到分离抗原的目的。 2.免疫磁珠技术的应用及优缺点 2.1 应用 食品有害微生物的检测（大肠杆菌0157、单核细胞增生李斯特菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等） 与PCR、ELISA及发光检测手段（荧光免疫分析、电化学发光分析等）的联用 细胞分离、生物大分子纯化等 2.2 优缺点 优点： 分离速度快、效率高 可重复性好、操作简单 不影响被分离细胞或其它生物材料的生物学性状和功能 缺点; 进口免疫磁珠价格昂贵，而国产磁珠敏感性不佳 特异性与所用抗体密切相关，有可能不能避免与其它物质交叉反应，因此需要辅助其它方法同时检测 3.免疫磁珠与ELISA联用的方案设计 磁珠-亲和素→生物素-抗体A →抗原→抗体B → HRP标记的二抗(C)→过氧化脲→鲁米诺显色 磁珠 A B C A A B B C C