实验八聚炳凝胶电泳.pptVIP

* 血清蛋白的分离 聚丙烯酰胺凝胶电泳法 一、实验目的 学习聚丙烯酰胺凝胶电泳原理 2) 掌握聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳的操作技术 二. 基本原理 (一) 电泳 电泳: 带电颗粒在电场的作用下,向着与其电性相反的电极移动的现象. (二) 聚丙烯酰胺凝胶电泳 用丙烯酰胺(Acr)单体和交联剂甲叉双丙烯酰胺(Bis)在催化剂作用下聚合成的多孔介质.以此凝胶为支持物的电泳称为聚丙烯酰胺凝胶电泳(简称PAGE)。 1. 聚丙烯酰胺凝胶有下列特性 (1) 凝胶有弹性，机械性能好；几乎无吸附和电渗作用，样品分离重复性好； (2)样品不易扩散，且用量少，其灵敏度较高。 (3)凝胶孔径可调节，通过改变单体及交联剂的浓度调节凝胶的孔径； (4)分辨率高，尤其在不连续凝胶电泳中，集浓缩、分子筛和电荷效应为一体。因而较醋酸纤维薄膜电泳、琼脂糖电泳等有更高的分辨率。 分子量范围 适用的凝胶浓度/(%) ?104 20-30 1-4×104 15-20 1-5×104-1×105 10-15 1×105 5-10 ?5×105 2-5 蛋白分子量范围与凝胶浓度的关系 2. 凝胶浓度的选择与被分离物质分