实验2 葡萄糖氧化酶法测定血清葡萄糖.pptVIP

表2-2 葡萄糖氧化酶法测定血清葡萄糖 加入物（ml） 空白管 标准管 测定管 血清 － － 0.02 葡萄糖标准应用液 － 0.02 － 蒸馏水 0.02 － － 酶酚混合试剂 3.0 3.0 3.0 2．病理性高血糖 （1）糖尿病 由于胰岛素绝对不足或相对不足，导致血糖增高。 （2）内分泌疾病 甲状腺功能亢进、嗜铬细胞瘤、肢端肥大症、巨人症、库欣（Cushing）综合征、高血糖素细胞瘤（glucagonoma）等，各种对抗胰岛素的激素分泌过多导致高血糖。注意升高血糖的激素增多引起的高血糖，现已归入特异性糖尿病中。 （3）颅内压增高 颅内压增高刺激血糖中枢，如颅外伤、颅内出血、脑膜炎等。 （4）脱水引起的高血糖 如呕吐、腹泻和高热等也可使血糖轻度增高。 3．生理性低血糖 见于饥饿和剧烈运动。 4．病理性低血糖 （1）胰岛β细胞增生或胰岛β细胞瘤等，使胰岛素分泌过多。 （2）对抗胰岛素的激素分泌不足，如垂体前叶功能减退、肾上腺皮质功能减退和甲状腺功能减退而使生长素、肾上腺皮质激素和甲状腺激素分泌减少。 （3）严重肝病患者，肝细胞糖原贮存不足及糖异生功能低下，肝脏不能有效地调节血糖。 * * 全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验实验指导 （第二版） * 全国高等医药院校医学检验专业规划教材 临床生物化学检验实验指导 （第二版） 实验2 葡萄糖氧化酶法测定血清葡萄糖 湘南学院医学检验系 蒋显勇 实验 2 葡萄糖氧化酶法测定血清葡萄糖 实验目的 掌握：葡萄糖氧化酶法测定血清葡萄糖基本原理和操作过程。 熟悉：葡萄糖氧化酶法的方法学评价。 了解：血清葡萄糖测定对糖尿病诊断的临床意义。 实验原理 试剂与器材 1．0.1mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.0） 2．酶试剂 3．酚溶液 4．酶酚混合试剂 5．12mmol/L苯甲酸溶液 6．100mmol/L葡萄糖标准贮存液 7．5mmol/L葡萄糖标准应用液 8．自动生化分析仪或分光光度计 操作步骤 2．手工操作法 取试管3支，按表2-2操作。 1．生化自动分析仪法 按仪器说明书的要求进行操作。 混匀，置37℃水浴中，温育15min，在分光光度计波长505nm处比色，以空白管调零，分别读取标准管及测定管吸光度。 计算 参考范围 健康成人空腹血清葡萄糖为: 3.9mmol/L～6.1mmol/L（70mg/dl ~110 mg/dl） 临床意义 1．生理性高血糖 (1) 饭后1 h ~2h； (2) 摄入高糖食物； (3) 紧张训练、剧烈运动和情绪紧张，肾上 腺素分泌增加。 注意事项 1．葡萄糖氧化酶法可用于直接测定脑脊液葡萄糖含量，但不能直接测定尿液葡萄糖含量。 2．测定标本用血清或以草酸钾-氟化钠为抗凝剂的 血浆。 3．严重黄疸、溶血及乳糜样血清应先制备无蛋白 血滤液，然后再进行测定。 评价 本法重复性较好，批内CV为0.7%～2.0%，批间CV为2%左右，日间CV为2%～3%；线性范围至少可达22.24mmol/L；准确性能满足要求，回收率为94%～105%。据文献报道，葡萄糖氧化酶法与己糖激酶法比较，相关系数为0.9986，回归方程y=1.0026x－2.29。 一些还原性物质如尿酸、维生素C、胆红素和谷胱甘肽等，可与色原性物质竞争过氧化氢，从而消耗反应过程中所产生的过氧化氢，使测定结果偏低。