动物微生物--病料的触片染色及细菌的分离培养(实验三).pptVIP

实验三 病料的触片染色及细菌的分离培养 一.实验目的与要求 1.培养无菌操作的意识 2.掌握病料的正确触片及美兰染色方法 3. 掌握病料细菌分离的操作步骤及其分区划线 二.实验仪器及材料 1. 仪器：恒温箱、显微镜等 2 .实验材料： 培养基：麦康凯培养基、胰蛋白胨大豆琼脂（TSA） 病料：猪肺、肝脏、脾脏等 酒精灯、接种环、剪刀、接种环、镊子等 染色液：美兰染色液 三.内容与方法 1.病料触片染色：灼烧剪刀、镊子从病料上剪取小块组织→→用新鲜切面在干净载玻片上轻触3～4个 触面→→自然干燥→→美兰染色。 2.美兰染色步骤：触片经过火焰固定→→滴加适量美兰染色液覆盖涂面→→染色3分钟→→晾干→→镜检→→菌体呈蓝色。 用灭菌的烙刀（趁热）对病料的表面进行灭菌 →→ 用灭菌的剪刀在病料上灭过菌的地方剪一切口 →→ 接种环灭菌，从切口取细菌 →→ 无菌操作进行平板分区划线 →→ 用过的剪刀、镊子、烙刀、接种环等烧灼灭菌 →→ 平板放入恒温箱中 18-24 小时 →→ 观察培养后的细菌菌落性状。 3.病料中细菌的分离培养： 4.分区划线 ① 右持接种环，烧灼冷却后，蘸取划线。 ② 左手抓握琼脂平板，在酒精灯火焰左上方，使平板面向火焰，右手将已沾的病料接种环在琼脂表面分区划线 ③ 划线完