化学生物学中的探针标记技术.pptVIP

Nat Biotechnol, 2003, 21, 86-89. AGT和受体组合荧光探针 将hAGT蛋白融合到目标蛋白上，然后利用hAGT蛋白本身的活性将DNA上的氧上被烷基化的鸟磦呤的烷基转移到它本身的半胱氨酸的硫原子上，在硫原子上进行细胞友好的烷基化反应，将标签分子连接到目标融合蛋白上。 DNA烷基转移酶(AGT) 人体DNA修复蛋白（hAGT, 25000 Da） Accounts Chem. Res. 2011, 44, 666-676. Accounts Chem. Res. 2011, 44, 730-741. Accounts Chem. Res. 2011, 44, 730-741. Accounts Chem. Res. 2011, 44, 784-792. Accounts Chem. Res. 2011, 44, 816-827. 非共价连接的蛋白荧光标记 六组氨酸标签－镍－荧光团络合物体系 F36V型荧光探针 抗体、生物素型荧光探针 DHFR型荧光探针 内蛋白介导的蛋白标记策略 陈磊、姚祝军，生命科学， 20，3－13 （2008）. Cy3或Cy5荧光团通过两个连接臂，并经由两个镍离子与六组氨酸标签通过强配位健络合，从而实现蛋白的定点标记。 Alice Ting at MIT Alice Ting, MIT 1376-1381 1382-1387 Alice Ting, MIT 1388-1393 1393-1398 Tsien’s Lab, UC San Diego 1399Peter G. Schultz, Scripps Research Institute 1400Peng Cheng, 北京大学 Nature Chemical biology (2011,2013) 1401-1402 1402-1408 1409-1414 The End. Tsien recently has set his sights on the imaging and treatment of cancer. He and his colleagues have built U-shaped peptide molecules to carry a payload—an imaging molecule or chemotherapy drug. The peptides are substrates for certain proteases, protein-cleaving enzymes that are exuded from tumor cells but rarely appear on normal cells. When the protease cleaves the bottom of the U, the two arms of the U are separated, unleashing one arm to drag the payload portion of the peptide into a neighboring cancer cell. Ive always wanted to do something clinically relevant in my career, if possible, and cancer is the ultimate challenge, Tsien says. * * * * 张力纤维（stress fiber）、 * 张力纤维（stress fiber）、 * * * 本身不具备专一的化学选择性，有的甚至会将细胞破坏。在一些复杂的体系中，如研究蛋白质之间的相互作用，酶与底物之间的相互作用以及蛋白质结构的测定，特别是利用FRET技术来研究蛋白质，上述常规方法无法实现目标蛋白质特异性地定点标记，且无法保证被标记的蛋白保持其原有的活性。 * 这种方法使用的荧光探针为一类能够穿透细胞膜和含有双砷基团的荧光分子（如FIAsH-EDT2）。双砷荧光标记分子进入细胞后，与连在重组目标蛋白质末端的六肽标签CCXXCC序列（简称TC，其中X是除了半胱氨酸意外的其它氨基酸）特异作用，生成强荧光的共价结合的双砷－四半胱氨酸体系（荧光强度约为FIAsH-EDT2的5000倍）。 * 致病菌无处不在，快速、灵敏、特异的致病菌检测分析对食品安全、环境监测、疾病诊断治疗和生物 恐怖袭击的防范等具有重要意义 * Here, we show that 1 can be metabolically incorporated into outer mem