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杨先泉制作 第五节 遗传工程 P166 一、 遗传工程概述 *二、 染色体工程 *三、 细胞工程 四、 基因工程 五、基因组学 一、 遗传工程概述 遗传工程(genetic engineering)是七十年代才开始发展起来的一门新技术。它是在分子遗传学的理论基础上，综合采用分子生物学与微生物学的现代方法和手段建立起来的。这一先进技术的兴起，标志着现代遗传学已发展到定向控制遗传性状的新阶段。 一、 遗传工程概述 遗传研究要阐明遗传与变异的现象和基本规律，探索遗传与变异的原因及其物质基础。在此基础上： 解释、研究生物进化的原因、过程和规律(遗传与进化)。 改善动、植物和微生物的遗传特性——按照人类的意愿，创造、培育各种生物的新类型、新品种的人工进化过程(育种学)。育种工作的理论和技术水平在很大程度上取决于遗传学所取得的成就。 讫今为止，动、植物育种的绝大部分成就都是以经典遗传、细胞遗传和数量遗传理论为基础所取得的。 六、七十年代的绿色革命； 育种工作面临的问题。 一、 遗传工程概述 (一)、 遗传工程的基础 人类对自然改造的能力取决于对自然规律的认识水平。分子遗传、生物化学及分子生物学、细胞生物学的理论和技术发展使生物遗传操作的能力正在不断提高。 遗传工程的理论与技术基础主要来自于： 1. 分子遗传学的理论； 2. 生物化学及分子生物学的成就； 3. 细胞生物学理论和技术。 (二)、 遗传工程的含义 生物技术 生物工程： 遗传工程； 蛋白质工程、酶工程； 微生物工程； …… 遗传工程：在分子遗传理论、技术的基础上，通过工程设计与施工方式，从细胞、分子水平改造生物遗传特性。 作为一个综合性的技术群体系，广义的遗传工程包含许多相关的组成部分，其主要的部分有三个： 1. 染色体工程； 2. 细胞工程； 3. 基因工程。 狭义的遗传工程指的是基因工程。 (二)、 遗传工程的含义 遗传工程或以分为狭义和广义的两种。??? 广义的遗传工程包括：基因工程、细胞工程、染色体工程、细胞器工程。习惯上所讲的遗传工程多指基因工程。??? 基因工程是一种操作，它不是通过一般传统的有性杂交方法，而是采取类似于工程建设的方式，按照预先设计的蓝图，借助于实验室的技术，将某种生物的基因或基因组转移到另一种生物中去，使后者定向地获得新的遗传性状，成为新的类型。 (二)、 遗传工程的含义 (二)、 遗传工程的含义 一般说来，进行基因工程首先需要一个施工的设计蓝图，然后才能进行施工的操作。?? 基因工程的施工程序大致分为四个步骤：1、为施工准备材料，即“目的”基因、载体和工具酶等。2、把目的基因与载体结合成重组DNA分子。3、把重组DNA分子引入受体细胞，建立分子无性繁系(Clone)或称克隆。4、从细胞群体中选出所需要的无性繁殖系，并使外源基因在受体细胞中正确表达。 (三)、基因的分离与合成 目的”基因即在遗传工程中所需要的基因，它的来源不外乎分离自然的基因与人工合成基因。 目前采用的方法主要有两种：鸟枪射击法和化学合成基因。(一)、利用鸟枪射击法(Shotgun)分离基因；??? 用限制性核酸内切酶把一个DNA分子切成一个或略大于一个基因的片段，然后把全部片段一一与载体组成重组DNA分子，转化到大肠杆菌K12中去，进行纯系繁殖，使每个基因片段都繁殖到适于研究的数量，再进行分离鉴定，选择出所需要的基因。 (三)、基因的分离与合成 (三)、基因的分离与合成 (二)、基因的化学合成??? 1970年考兰纳(Khorana，H.G)等采用有机化学的方法首次合成了转录成酵母丙氨酸tRNA的基因，为基因的合成开辟了一条新的道路。考兰纳先合成大量彼此互补的10-15个核苷酸单链片段，然后用连接酶将它们连接并配合成双链。 一、 遗传工程概述 一、 遗传工程概述 一、 遗传工程概述 一、 遗传工程概述 一、 遗传工程概述 一、 遗传工程概述 一、 遗传工程概述 一、 遗传工程概述 一、 遗传工程概述 *二、染色体工程 染色体工程是物种间遗传转移的最传统的方式，也是目前广泛进入生产应用的遗传工程。 其重要性因作物不同而异： 对蕃茄而言，世界上任何具有商业价值的栽培品种都带有一个从野生种导入的抗枯萎病性状，其它六个野生种则是耐盐性、抗虫性等性状的来源。 小麦许多抗白粉病基因和抗锈病基因都来源于其野生近缘物种。 相反，蚕虫改良则完全是在栽培种(Vicia faba)内进行杂交选择。现在还不能从其它任何种导入基因到该作物中。 (一)、 种间有性杂交 生殖隔离是物种形成的原因之一，也是染色体工程面临的第一个难题，获得种间有性杂种的难易直接影响外源基因导入栽培作物。 对不同的作物而言，种间杂交障碍的机制可能截然不同，其表现阶段也各不相同。目前认为，